聶永春 蘇曉芳 李明月 王慶華

Abstract? Objective：To explore the protective effect of gardenia jasminoides ellis and early enteral nutrition on intestinal mucosal barrier function in rats with severe acute pancreatic.Methods：90 SD rats were randomly divided into control check group，severe acute pancreatitis group，gardenia jasminoides ellis group，early enteral nutrition group，and gardenia jasminoides ellis and early enteral nutrition group，with 18 rats in each group.Gardenia jasminoides ellis group，gardenia jasminoides ellis and early enteral nutrition group were given gardenia jasminoides ellis extract（1 mL/100 g） by gavage immediately，9 h，21 h and 33 h after the model woke up.Early enteral nutrition group， gardenia jasminoides ellis and early enteral nutrition group were evenly injected with enteral nutrition solution（1 mL/100 g） through the jejunostomy tube 12 h after the model was established，and once every 1.5 h，15 min each time.Control check group and severe acute pancreatitis group were given 0.9% sodium chloride solution at the same time by the same way as above.Six rats were sacrificed at 12 h，24 h and 36 h after modeling，respectively.The serum amylase（AMY） and Ca2+concentrations of rats in were detected by automatic biochemical analyzer.Hematoxylin?eosin（HE） staining was used to observe the pathological changes of intestinal tissues of rats in each group，and the corresponding pathological scores were determined.Wet/Dry weight ratio（W/D） was used to detect the degree of intestinal tissue swelling in each group.The changes of DAO，TNF?α，HO?1 and IL?10 in serum were detected by enzyme?linked immunosorbent assay（ELISA）.Results：With the prolongation of time （12 h，24 h，36 h），compared with severe acute pancreatitis group，the injury degree of intestinal mucosal tissue was lower，pathological score，W/D mass of intestinal mucosa，serum AMY and serum DAO concentration in early enteral nutrition group，gardenia jasminoides ellis group and early enteral nutrition and gardenia jasminoides ellis group were decreased（P<0.05），and serum Ca2+concentration was increased（P<0.05）.Compared with the early enteral nutrition group and gardenia jasminoides ellis group，the serum Ca2+concentration of gardenia jasminoides ellis and early enteral nutrition group increased，and the injury degree of the intestinal mucosal tissue was lower，pathological score，W/D mass of intestinal mucosa，serum DAO concentration decreased（P<0.05）.With the prolongation of time（12 h，24 h，36 h），compared with severe acute pancreatitis group，the concentrations of serum TNF?α in early enteral nutrition group，gardenia jasminoides ellis group and early enteral nutrition and gardenia jasminoides ellis group were lower，while the concentrations of serum HO?1 and IL?10 were higher（P<0.05）.Compared with early enteral nutrition group and gardenia jasminoides ellis group，the concentrations of serum HO?1 and IL?10 in early enteral nutrition and gardenia jasminoides ellis group increased，and serum TNF?α decreased（P<0.05）.Conclusion：Gardenia jasminoides ellis and early enteral nutrition had protective effects on intestinal mucosal barrier injury in rats with severe acute pancreatitis，mainly through upregulating anti?inflammatory factors IL?10，HO?1，and down?regulating pro?inflammatory factor TNF?α to reduces the damage of inflammatory reaction to intestinal mucosal barrier.

Keywords? gardenia jasminoides ellis； early enteral nutrition； severe acute pancreatitis； intestinal mucosal barrier； rat

摘要? 目的：探討梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)對重癥急性胰腺炎（SAP）大鼠腸黏膜的保護作用。方法：將90只SD大鼠按隨機數(shù)字表法分為空白對照組、重癥急性胰腺炎模型組、梔子組、早期腸內(nèi)營養(yǎng)組及梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組，每組18只。梔子組、梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組大鼠于造模蘇醒后即刻、9 h、21 h、33 h給予梔子提取液（1 mL/100 g）灌胃，早期腸內(nèi)營養(yǎng)組、梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組于造模后12 h經(jīng)空腸造瘺管均勻注入腸內(nèi)營養(yǎng)液（百普素，1 mL/100 g），每隔1.5 h給予1次腸內(nèi)營養(yǎng)液，每次15 min。空白對照組和重癥急性胰腺炎模型組按上述相同方式同時給予0.9%氯化鈉溶液。分別于造模后12 h、24 h、36 h處死6只大鼠并進行取材，檢測各組大鼠血清淀粉酶（AMY）、血清鈣離子（Ca2+）的濃度變化；蘇木精?伊紅（HE）染色觀察各組大鼠腸組織病理變化并進行相應(yīng)病理評分；使用腸濕干質(zhì)量之比（W/D）檢測各組大鼠腸組織腫脹程度；使用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測各組大鼠血清二胺氧化酶（DAO）、腫瘤壞死因子?α（TNF?α）、血紅素氧合酶1（HO?1）以及白介素?10（IL?10）濃度。結(jié)果：隨著時間變化（12 h、24 h、36 h），與重癥急性胰腺炎模型組比較，早期腸內(nèi)營養(yǎng)組、梔子組、梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組大鼠腸黏膜組織損傷程度、病理評分、腸黏膜組織W/D質(zhì)量、血清AMY、血清DAO濃度降低（P<0.05），血清Ca2+濃度升高（P<0.05）。與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組、梔子組比較，梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組血清Ca2+濃度升高，大鼠腸黏膜組織損傷程度、病理評分、腸黏膜組織W/D、血清AMY、血清DAO濃度降低（P<0.05）。隨著時間的（12 h、24 h、36 h）延長，與重癥急性胰腺炎模型組比較，早期腸內(nèi)營養(yǎng)組、梔子組、梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組大鼠血清TNF?α濃度降低，血清HO?1、IL?10濃度升高（P<0.05）。與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組、梔子組比較，梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組血清HO?1、IL?10濃度升高，血清TNF?α濃度降低（P<0.05）。結(jié)論：梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)對重癥急性胰腺炎大鼠腸黏膜屏障損傷有保護作用，主要是通過上調(diào)血清抗炎因子IL?10、HO?1濃度，下調(diào)血清促炎因子TNF?α濃度減輕炎癥反應(yīng)對腸黏膜屏障的損傷。

關(guān)鍵詞? 梔子；早期腸內(nèi)營養(yǎng)；重癥急性胰腺炎；腸黏膜屏障；大鼠

doi：10.12102/j.issn.1009-6493.2023.08.007

重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatic，SAP）是消化系統(tǒng)急危重癥疾病，腸道是應(yīng)激反應(yīng)中心和最先受損傷的器官，重癥急性胰腺炎常繼發(fā)腸黏膜屏障功能障礙[1]。腸道內(nèi)的細菌和毒素移位至腸道相關(guān)淋巴結(jié)，并經(jīng)血液循環(huán)抵達全身，加重炎癥反應(yīng)，甚至誘發(fā)多器官衰竭（multiple organ failure，MOF），加快重癥急性胰腺炎病人病情進展[2]。重癥急性胰腺炎病人中因腸道細菌移位引發(fā)并發(fā)癥造成死亡例數(shù)為其死亡總例數(shù)的4/5。近年來，中醫(yī)與西醫(yī)聯(lián)合應(yīng)用的整體治療在重癥急性胰腺炎病人腸屏障損傷治療中的優(yōu)勢不斷顯現(xiàn)，已成為重癥急性胰腺炎病人腸屏障損傷治療的重要方式[3]。早期腸內(nèi)營養(yǎng)可減輕腸黏膜屏障損傷。梔子屬于臨床上常用的藥食同源中藥材，含京尼平苷、西紅花苷、都桷子苷等多種成分，在免疫調(diào)節(jié)、保肝利膽、降糖調(diào)脂、抗炎、抗氧化應(yīng)激等多方面發(fā)揮作用[4]?；A(chǔ)實驗發(fā)現(xiàn)，梔子對腸黏膜屏障具有保護作用，但目前梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)對重癥急性胰腺炎病人腸黏膜屏障功能的作用及兩者是否發(fā)揮協(xié)同作用尚不清楚[5?6]。因此，本研究將梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)聯(lián)合，探討其對重癥急性胰腺炎病人腸黏膜屏障的保護作用，以期為臨床治療提供實驗依據(jù)。

1? 材料與方法

1.1 實驗動物及分組 選取90只雄性清潔級SD大鼠，體質(zhì)量220～260 g，購自濟南朋悅動物實驗繁殖有限責(zé)任公司，實驗動物許可證碼：SCXK（魯）20190007，于某醫(yī)學(xué)院清潔級動物房飼養(yǎng)。所有實驗設(shè)計遵循某醫(yī)學(xué)院實驗動物使用指南并經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會批準（倫理編號：2020?81）。采用隨機數(shù)字表法將90只SD大鼠分為空白對照組、重癥急性胰腺炎模型組、早期腸內(nèi)營養(yǎng)組、梔子組、梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組，每組18只大鼠。

1.2 藥物及主要實驗試劑 百普素（生產(chǎn)廠家：Milupa GmbH，德國）；梔子（生產(chǎn)廠家：亳州仁益藥材有限公司）；?；悄懰徕c（購自美國Sigma公司）；大鼠血清二胺氧化酶（DAO）、腫瘤壞死因子?α（TNF?α）、血紅素氧合酶1（HO?1）以及白介素?10（IL?10）酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）試劑盒（購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司）；蘇木精?伊紅（HE）染液（購自北京索萊寶科技有限公司）。

1.3 動物模型制備 根據(jù)Aho等[7]提出的重癥急性胰腺炎造模方式復(fù)制模型，操作方法如下：①用10%水合氯醛0.3 mL（100 g）麻醉SD大鼠。②75%乙醇打濕SD大鼠腹部毛發(fā)并修剪，沿大鼠腹白線切割直至白膜后改用剪刀輕輕劃開，鋪無菌紗布，血管鉗夾住腹腔兩側(cè)的皮膚，于肝臟下稍左上位置可觀察到粉色的組織，周圍被十二指腸包繞，即為胰腺組織。③將十二指腸提取并稍微抬高，用無菌動脈夾夾住靠近肝臟端的胰膽管，將3.8%牛磺膽酸鈉0.1 mL（100 g）溶液用26G靜脈留置針沿十二指腸周圍無血管的部位緩慢注入膽胰管（0.06 mL/min），并用無菌紗布覆蓋腹腔，注射完畢5 min后，胰腺組織明顯充血且呈深色。與造模前有明顯的差距，說明模型初步成功。④取出靜脈留置針，并輕輕地用浸濕的棉簽按壓出血部位，松開靠近肝臟位置的動脈夾，將胰腺、腸組織盡量恢復(fù)到解剖位置，逐層縫合，將0.9%氯化鈉溶液經(jīng)后頸部皮下注入大鼠體內(nèi)。⑤將大鼠復(fù)溫并置于鼠籠中飼養(yǎng)，只需限制飲食?？瞻讓φ战M造模方式與重癥急性胰腺炎模型組相似，僅需將3.8%?；悄懰徕c換成0.9%氯化鈉溶液。

1.4 藥物制備及給藥方法

1.4.1 藥物制備 ①梔子制備：將梔子與75%的乙醇按照1∶10的比例混勻，靜置12 h，回收濾液，重復(fù)2次，將回收的濾液放于蒸餾瓶中進行加熱，當濾液變成黏糊狀時停止操作。利用減壓操作技術(shù)獲得梔子浸膏，放置于-80 ℃冰箱中冷藏備用。將梔子浸膏溶于生理鹽水中，最終獲得0.5 g/mL的梔子（已轉(zhuǎn)換成生藥的含量）。②百普素腸內(nèi)營養(yǎng)液制備：將Milupa GmbH生產(chǎn)的含有多種成分的每袋125 g的百普素粉末（生產(chǎn)批號：H20100287）溶于50 mL溫水中，充分攪拌混勻，然后再加入溫水定容至500 mL。

1.4.2 給藥方法 梔子組、梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組大鼠于造模蘇醒后即刻、9 h、21 h、33 h給予梔子提取液1 mL（100 g）灌胃，早期腸內(nèi)營養(yǎng)組、梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組于造模后12 h經(jīng)空腸造瘺管均勻注入腸內(nèi)營養(yǎng)液（百普素，1 mL/100 g），每隔1.5 h給予1次腸內(nèi)營養(yǎng)液4 mL，每次15 min，循序漸進加至每天62.5 mL，每天每只大鼠需供能25 kcal（100 g）。空白對照組、重癥急性胰腺炎模型組經(jīng)上述相同方式給予0.9%氯化鈉溶液。

1.5 標本采集 各組均于造模后12 h、24 h、36 h各取6只大鼠采腹主動脈血后處死，收集上層血液用于血清學(xué)指標的檢測。留取胰腺和回腸組織，清除周圍的血漬和黏連的組織，用于HE染色、腸組織濕/干質(zhì)量（W/D）的檢測。

1.5.1 血清學(xué)指標的檢測 大鼠腹主動脈采血5～8 mL，血液標本采集后在常溫下靜置30 min以上，于離心機（4 ℃）中按3 500 r/min，離心25 min，收集上清。依據(jù)ELISA試劑盒的說明書測定血清DAO、TNF?α、HO?1、IL?10的表達水平。全自動生化儀測定血清淀粉酶（AMY）以及鈣離子（Ca2+）濃度。

1.5.2 回腸組織病理觀察 大鼠處死后，將距回盲部2 cm處回腸組織（腸組織保持空虛狀態(tài)）于4%多聚甲醛中固定24～48 h，脫水包埋切片，進行HE染色，在光鏡下按照Chiu等[8]6級評分法進行形態(tài)學(xué)觀察，并采用雙盲法，由專業(yè)的病理師對其進行評分。

1.5.3 腸組織W/D 用磷酸鹽緩沖液將距回盲部遠端5 cm的回腸組織沖洗干凈，去除殘余的血漬及周圍黏連組織，將多余的水分用濾紙吸凈，于精密稱量儀上測得濕質(zhì)量。放于65 ℃烘箱48 h進行烘干后測得干質(zhì)量。通過W/D×100%計算組織腫脹度。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 20.0數(shù)據(jù)分析軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。符合正態(tài)分布的定量資料采用均數(shù)±標準差（x±s）進行描述，組間比較采用重復(fù)測量方差分析，組內(nèi)比較采用單因素方差分析。定性資料以只數(shù)、百分比（%）表示，行χ2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1 大鼠回腸組織HE染色結(jié)果 重癥急性胰腺炎模型組：大鼠腸黏膜組織形態(tài)不完整，絨毛頂端破損，上皮下的間隙增寬，與固有層分離明顯并伴炎性細胞浸潤，隨時間延長病理損傷逐漸加重?？瞻讓φ战M：大鼠腸黏膜組織結(jié)構(gòu)比較清晰、完整。早期腸內(nèi)營養(yǎng)組、梔子組、梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組上述變化明顯改善，且梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組腸黏膜組織病理損傷程度低于梔子組以及早期腸內(nèi)營養(yǎng)組。詳見圖1。

2.2 各組大鼠血清AMY、Ca2+濃度變化 大鼠血清AMY、Ca2+重復(fù)測量方差分析結(jié)果顯示，時間與組間交互作用顯著，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），表明經(jīng)不同干預(yù)措施處理的SD大鼠血清AMY、Ca2+濃度隨時間（12 h、24 h、36 h）的延長變化幅度不同，梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組大鼠血清Ca2+濃度高于重癥急性胰腺炎模型組、早期腸內(nèi)營養(yǎng)組、梔子組；血清AMY濃度低于重癥急性胰腺炎模型組、早期腸內(nèi)營養(yǎng)組、梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），詳見表1。

2.3 各組大鼠腸黏膜組織病理評分、W/D、血清DAO濃度比較 大鼠腸黏膜組織病理評分、W/D、DAO濃度經(jīng)重復(fù)測量方差分析結(jié)果顯示，時間與組間交互作用顯著，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），表明經(jīng)不同干預(yù)措施處理的SD大鼠腸黏膜組織病理評分、W/D、血清DAO濃度隨時間（12 h、24 h、36 h）的延長變化幅度不同，梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組大鼠上述指標低于重癥急性胰腺炎模型組、早期腸內(nèi)營養(yǎng)組、梔子組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），詳見表2。

2.4 各組大鼠血清炎性因子變化 大鼠血清TNF?α、HO?1、IL?10經(jīng)重復(fù)測量方差分析結(jié)果顯示，時間與組間交互作用顯著，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），表明經(jīng)不同干預(yù)措施處理的SD大鼠TNF?α、HO?1、IL?10濃度隨時間（12 h、24 h、36 h）的延長變化幅度不同，梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組大鼠血清HO?1、IL?10濃度高于重癥急性胰腺炎模型組、早期腸內(nèi)營養(yǎng)組、梔子組，TNF?α濃度低于重癥急性胰腺炎模型組、早期腸內(nèi)營養(yǎng)組、梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），詳見表3。

3? 討論

重癥急性胰腺炎伴發(fā)腸黏膜屏障損傷常與炎癥因子“無節(jié)制”地釋放、腸腔營養(yǎng)物的缺乏以及腸組織缺血、缺氧等發(fā)病機制有關(guān)[9]。目前，關(guān)于重癥急性胰腺炎腸黏膜屏障損傷的治療方式眾多，但都缺乏較有效的干預(yù)方式。Pan等[10]通過大鼠軟骨細胞體外實驗發(fā)現(xiàn)，梔子通過抑制磷脂酰肌醇3?激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）/核轉(zhuǎn)錄因子κβ（NF?κβ）信號通路對骨關(guān)節(jié)炎起到治療作用。莫霏霏等[11]基于潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型發(fā)現(xiàn)，梔子苷通過抑制腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/肌球蛋白輕鏈激酶（MLCK）信號通路下調(diào)炎性因子表達發(fā)揮屏障保護作用。蔡雪軍等[12]發(fā)現(xiàn)，早期腸內(nèi)營養(yǎng)通過降低降鈣素原（PCT）、C?反應(yīng)蛋白（CRP）、白細胞（WBC）表達水平減輕重癥急性胰腺炎病人腸源性感染?；跅d子抑制炎癥反應(yīng)以及早期腸內(nèi)營養(yǎng)對腸黏膜屏障損傷發(fā)揮的積極作用，本研究推斷梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)對重癥急性胰腺炎腸黏膜屏障的損傷均具有治療作用。

胰蛋白酶過度激活以及Ca2+超載學(xué)說是最早探討重癥急性胰腺炎致病過程的2條途徑，常引發(fā)血清AMY濃度增高、血清Ca2+濃度降低。本研究結(jié)果顯示，重癥急性胰腺炎模型組大鼠血清AMY濃度較空白對照組升高（P<0.05），血清Ca2+濃度降低（P<0.05），表明重癥急性胰腺炎模型復(fù)制成功。DAO屬于腸黏膜屏障損傷和完整性的標志物。正常情況下，血液中不含DAO，當腸組織發(fā)生損傷時，腸組織中DAO釋放到血液中，引起血清DAO濃度增高。血清DAO濃度的變化與腸組織病理損傷評分、腸黏膜屏障的完整性呈正相關(guān)[13]。本研究結(jié)果顯示，重癥急性胰腺炎模型組大鼠血DAO濃度、腸組織病理損傷評分以及腸組織W/D均較空白對照組升高（P<0.05），表明重癥急性胰腺炎伴發(fā)腸黏膜屏障損傷模型復(fù)制成功。通過給予重癥急性胰腺炎大鼠實施早期腸內(nèi)營養(yǎng)、梔子、梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)干預(yù)，結(jié)果顯示，與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組和梔子組比較，梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組血清Ca2+濃度升高，血清AMY濃度降低（P<0.05），表明梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)具有改善重癥急性胰腺炎腸黏膜屏障損傷的作用。首先，梔子中京尼平苷具有降胰淀粉酶的生物特性，能夠抑制胰淀粉酶通過靜脈進入到血液中，發(fā)揮減輕血清淀粉酶濃度的作用[14]。其次，梔子具有降低環(huán)核苷酸濃度，提升Ca2+?Mg2+?三磷酸腺苷酶（ATP）生物活性，從而增加血清Ca2+濃度的作用，與王磊[15]的研究結(jié)果相似，其研究發(fā)現(xiàn)，梔子可通過增加超氧化物歧化酶濃度、減輕線粒體膜損傷、抑制氧自由基的釋放發(fā)揮減輕腸黏膜屏障損傷，與Cui等[16]的研究結(jié)果亦相似。另外，早期腸內(nèi)營養(yǎng)不僅具有增強重癥急性胰腺炎大鼠腸蠕動、維持腸道菌群平衡、降低腸源性感染風(fēng)險的作用，還具有促進腸腔吸收營養(yǎng)物質(zhì)、刺激腸黏膜、減輕腸萎縮的功能，對重癥急性胰腺炎腸黏膜屏障損傷發(fā)揮保護作用[17?18]，與Zhang等[19]的研究結(jié)果相似。因此，梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組腸黏膜組織病理評分、W/D、血清DAO濃度降低。本研究結(jié)果在一定程度上表明早期腸內(nèi)營養(yǎng)與梔子聯(lián)合應(yīng)用改善腸黏膜屏障損傷的功效優(yōu)于單獨應(yīng)用早期腸內(nèi)營養(yǎng)或梔子。

炎癥因子“無節(jié)制”地釋放在重癥急性胰腺炎病人腸黏膜屏障功能障礙中發(fā)揮重要的作用，對腸黏膜屏障損傷起“助燃劑”的作用[20]。首先，在重癥急性胰腺炎起始階段，損傷或壞死的胰腺組織激活免疫細胞中的單核巨噬細胞系統(tǒng)，促使中性粒細胞活化、氧自由基以及TNF?α、IL?6等炎性因子相繼無限釋放，機體IL?10、HO?1等抗炎因子無法與之匹敵，造成全身炎癥反應(yīng)綜合征（SIRS），繼發(fā)腸黏膜屏障損傷[21]。其次，腸黏膜在其他不利因素（腸腔內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)匱乏）刺激下激活腸道相關(guān)淋巴組織，釋放IL?8、IL?1β等促炎因子，對腸黏膜屏障造成損傷，促使重癥急性胰腺炎大鼠血清中炎癥因子增多[22]。研究發(fā)現(xiàn)，在炎癥因子風(fēng)暴中，TNF?α是一種多效應(yīng)性的炎癥因子，在重癥急性胰腺炎由局限性炎癥反應(yīng)進展為全身炎癥反應(yīng)綜合征甚至多器官功能衰竭（MOF）的過程中發(fā)揮“閥門”作用，能夠激活并釋放多種促炎因子，影響重癥急性胰腺炎病人的病情和預(yù)后[23]。IL?10最初為Th2細胞分泌的多功能炎癥因子，在細胞生長與分化、炎癥介質(zhì)與免疫調(diào)節(jié)方面發(fā)揮著重要作用[24]，具有拮抗TNF?α、IL?8等炎癥因子釋放的功效，并能較好地預(yù)測重癥急性胰腺炎病人病情的嚴重程度[25]。HO?1是具有多種功能作用的保護酶，HO?1基因過表達能夠減輕氧化損傷以及炎癥反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)，重癥急性胰腺炎早期，HO?1蛋白在炎癥刺激下過度表達通過顯著增加血清IL?10濃度、降低TNF?α濃度，對腎臟等組織損傷發(fā)揮保護作用[26]。本研究結(jié)果顯示，重癥急性胰腺炎模型組TNF?α、HO?1、IL?10濃度比空白對照組高（P<0.05），表明炎癥因子風(fēng)暴參與了重癥急性胰腺炎腸黏膜屏障的損傷。給予重癥急性胰腺炎大鼠實施早期腸內(nèi)營養(yǎng)、梔子、早期腸內(nèi)營養(yǎng)與梔子后，與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組、梔子組比較，梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)組大鼠血清HO?1、IL?10濃度升高（P<0.05），血清TNF?α濃度降低（P<0.05），表明梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)具有降低炎癥反應(yīng)的作用，且作用效果優(yōu)于單獨應(yīng)用早期腸內(nèi)營養(yǎng)或者梔子。主要原因可能為：首先，梔子中含有的有效成分梔子苷具有抗炎作用，可減輕促炎因子的釋放。張清平等[27]研究表明，梔子的有效成分梔子苷能夠抑制核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體3（NLRP3）炎性小體的激活，降低下游炎性因子IL?18以及IL?1β的生成和釋放。其次，梔子能夠促進有益菌群（雙歧桿菌、乳酸桿菌）的繁殖以及抑制有害菌群（腸桿菌、腸球菌）的生長，從而發(fā)揮調(diào)控腸道菌群穩(wěn)態(tài)的功效，減輕炎癥因子對腸黏膜屏障損傷[28]。最后，早期腸內(nèi)營養(yǎng)具有改善腸黏膜病理損傷、增強免疫功能、降低菌群以及內(nèi)毒素易位的作用，發(fā)揮屏障保護功能，降低炎癥因子對腸黏膜屏障的侵襲。本研究結(jié)果也在一定程度上證明了早期腸內(nèi)營養(yǎng)與梔子具有協(xié)同作用，共同發(fā)揮減輕抗炎功效。

4? 小結(jié)

綜上所述，梔子與早期腸內(nèi)營養(yǎng)通過上調(diào)血清HO?1、IL?10濃度及下調(diào)血清TNF?α濃度發(fā)揮抗炎作用，減輕炎癥反應(yīng)對腸黏膜屏障的損傷，為重癥急性胰腺炎伴腸黏膜屏障損傷病人的治療提供一定的借鑒。

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（收稿日期：2022-05-10；修回日期：2023-03-20）

（本文編輯 曹妍）