常氧組
- 過表達FAM3A通過激活PI3K/Akt信號通路減輕低氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的心肌細胞損傷
用,將細胞分為常氧組、H/R組、H/R+空載體組和H/R+FAM3A載體組。常氧組心肌細胞在常氧條件下培養(yǎng);H/R組心肌細胞低氧培養(yǎng)6 h,然后常氧培養(yǎng)12 h;H/R+空載體組心肌細胞轉(zhuǎn)染pcDNA3.1空載體,然后進行H/R處理;H/R+FAM3A載體組心肌細胞轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-FAM3A,然后進行H/R處理。分組二:為了驗證FAM3A通過PI3K/Akt信號通路減輕H/R損傷,將細胞分為常氧組、H/R+空載體組、H/R+FAM3A載體組和H/R+
山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2023年9期2023-10-23
- miR-22-3p靶向調(diào)控PLAGL2保護OGD/R誘導(dǎo)的心肌細胞損傷機制研究
據(jù)是否缺氧分為常氧組、OGD/R 組,根據(jù)是否轉(zhuǎn)染miR-22-3p mimic 分為OGD/R 組+miR-NC組,OGD/R+miR-22-3p 組,根據(jù)是否共轉(zhuǎn)染miR-22-3p mimic 和Fer-1 分為OGD/R+Fer-1 組和OGD/R-Fer-1+miR-22-3p 組,根據(jù)是否共轉(zhuǎn)染miR-22-3p mimic 和PLAGL2 過表達質(zhì)粒分為OGD/R+miR-22-3p 組和OGD/R+miR-22-3p+PLAGL2 組。OG
全科醫(yī)學(xué)臨床與教育 2023年9期2023-10-17
- miR21-5p靶向轉(zhuǎn)錄激活蛋白STAT3減輕高氧性急性肺損傷
6J 隨機分為常氧組、高氧組、高氧+miR21-5p 組及高氧+空載體組。常氧組飼養(yǎng)于正常空氣中,高氧+miR21-5p組和高氧+空載體組分別經(jīng)氣管導(dǎo)管滴入50 μL滴度為(1×1012TU/mL)的miR21-5p-AAV6 或空載體,每組分籠飼養(yǎng)3 周后,參照劉國躍[12]的方法建立HALI 模型:將實驗用C57BL/6J小鼠飼養(yǎng)于55 cm×40 cm×35 cm 的密閉有機玻璃容器自制高氧箱中,右側(cè)開孔接單向閥控制的氧氣接頭;左側(cè)開孔接氧濃度和二氧
實用醫(yī)學(xué)雜志 2023年1期2023-02-17
- 低氧組訓(xùn)模式對消防官兵體能的影響研究
低氧組40人、常氧組40人和普通組40人(低氧組和常氧組訓(xùn)練方案相同,區(qū)別為有無低氧環(huán)境。普通組按照單位計劃組訓(xùn))。受試者均身體健康,肢體沒有異常。1.2 測試方法嚴格按照國家軍用標準《中國人民解放軍軍事體育訓(xùn)練大綱》的軍人體質(zhì)評價測定方法,在消防官兵入營2 個月后(訓(xùn)前)及訓(xùn)練結(jié)束前,分別對調(diào)查對象逐一進行單杠引體向上、雙杠雙臂屈伸、仰臥起坐、3000m 跑、基礎(chǔ)體能組合1 和基礎(chǔ)體能組合2 等6 個項目測定,對其結(jié)果進行集訓(xùn)前、后檢驗和方差齊性分析處理
當(dāng)代體育科技 2022年19期2022-07-28
- 速效救心丸經(jīng)ALKBH5/m6A調(diào)控自噬減輕缺氧/復(fù)氧心肌細胞損傷
之間,隨機分為常氧組、缺復(fù)/復(fù)氧組、速效+缺氧/復(fù)氧組、川芎嗪+缺氧/復(fù)氧組、冰片+缺氧/復(fù)氧組,藥物預(yù)處理1 h之后進行缺氧/復(fù)氧處理,待到規(guī)定時間后收集細胞mRNA和蛋白。2.4 Western blot檢測ALKBH5的表達 提取各組細胞蛋白,BCA試劑盒蛋白定量后變性,上樣、電泳、轉(zhuǎn)膜,脫脂奶粉封閉,加入ALKBH5一抗(1∶2 000),4 ℃過夜孵育,洗膜后加入二抗(1∶10 000),室溫孵育2 h,洗膜,顯影。2.5 Human ALKBH
中成藥 2022年3期2022-07-22
- 孕期慢性缺氧對子代大鼠心臟損傷及氧化應(yīng)激水平的影響*
n=20)分為常氧組(n=8)和缺氧組(n=12),被關(guān)在一個單獨的籠子里,于通風(fēng)良好,環(huán)境溫度18℃~20℃,相對濕度50%~60%的環(huán)境內(nèi),在12h光照/12h黑暗循環(huán)下,定期更換墊料。參照Williams[7]和王振華等[8]實驗方法建立宮內(nèi)缺氧模型:將孕鼠于妊娠第4d置入低壓缺氧箱內(nèi)(氧氣濃度:10%±0.1%),維持4h,移出后隨機取4只孕鼠麻醉后抽取動脈血行血氣分析檢查,判斷造模成功與否。在妊娠第4d至妊娠第21d期間,每天上、下午各一次缺氧處
罕少疾病雜志 2022年7期2022-06-26
- miR-216a、miR-301a調(diào)控BMPR2促進缺氧環(huán)境下肺動脈平滑肌細胞的增殖
基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,常氧組細胞于21% O2、5% CO2、74% N2的37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h,缺氧組細胞于3% O2、5% CO2、92% N2的37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)HPASMC在缺氧環(huán)境下培養(yǎng)時間的不同分為3組,分別為缺氧12 h、缺氧24 h和缺氧48 h組。1.2.2細胞轉(zhuǎn)染 HPASMC傳代培養(yǎng)至細胞密度達70%時,更換為無血清的培養(yǎng)基,根據(jù)Lipofectamine 3000試劑盒說明書,將miR-216a和miR-301a模擬物、
江蘇大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版) 2022年3期2022-05-31
- 紅景天苷對高氧致新生小鼠支氣管肺發(fā)育不良的保護作用研究*
生小鼠隨機分為常氧組、高氧組、紅景天苷組,每組12只。常氧組新生小鼠暴露于室內(nèi)空氣中由母鼠喂養(yǎng),高氧組、紅景天苷組新生小鼠置于自制氧氣箱中飼養(yǎng)[5],母鼠與小鼠同箱。氧箱條件:氧濃度維持在60%以上,箱內(nèi)置鈉石灰使CO2水平小于0.5%,溫度為25~27 ℃,濕度為50%~70%。每天持續(xù)給氧23.5 h,上午定時開艙0.5 h以添加食物、水及更換墊料。14 d后暴露于室內(nèi)空氣中飼養(yǎng)。紅景天苷組每天腹腔內(nèi)注射紅景天苷40 mg/kg,常氧組、高氧組腹腔內(nèi)注
現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生 2022年9期2022-05-17
- 基于miR-223/NLRP3 軸研究柚皮素對氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變中小膠質(zhì)細胞活化的影響
機數(shù)字表法分為常氧組、OIR組、NAR組、NAR+陰性對照組、NAR+miR-223拮抗劑組,每組30只。除常氧組外,其余各組參考文獻[7],幼鼠及其母鼠在P7~P12移至封閉氧箱中,氧氣體積分數(shù)(75±2)%,連續(xù)5d,P12返回正常氧環(huán)境中。常氧組在正常氧環(huán)境中常規(guī)飼養(yǎng)。250mg CMC溶于ddH2O中,定容至100mL過夜。1.0g NAR溶于含CMC的溶劑中,定容100 mL,配置成10mg/mL溶液備用。NAR組幼鼠腹腔注射100mg/(kg·
中國比較醫(yī)學(xué)雜志 2022年2期2022-03-25
- 基于可穿戴技術(shù)監(jiān)控的女性低氧與常氧運動減肥對比研究
隨機分組,分為常氧組與低氧組(常氧組1名受試者因自身原因推出該項目)。最終,參加該實驗常氧組8人,低氧組10人,兩組受試者均不了解分組情況。納入標準:(1)南京體育學(xué)院女大學(xué)生;(2)BMI≥22kg/m2。排除標準:(1)有心臟病史;(2)患有影響運動的疾病或不配合者。在實驗開始前對受試者進行實驗內(nèi)容及注意事項的介紹,所有受試者均自愿參加該實驗。該實驗得到了南京體育學(xué)院人體實驗倫理委員會的批準。1.2 實驗方法在實驗開始前后,每位受試者進行身體成分測量以
當(dāng)代體育科技 2022年1期2022-03-03
- 溶酶體組織蛋白酶B增加自噬保護缺氧誘導(dǎo)的心臟微血管內(nèi)皮細胞損傷
組:① WT-常氧組:分離C57BL6J野生型小鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞,采用常氧(5%CO2,95%空氣)培養(yǎng)48 h;② KO-常氧組:分離CTSB基因敲除小鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞,采用常氧處理48 h。③ WT-缺氧組:分離C57BL6J野生型小鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞,采用缺氧(5%氧氣,95%N2)培養(yǎng)48 h;④ KO-缺氧組:分離CTSB基因敲除小鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞,采用缺氧處理48 h。1.2.2.2 第二部分 將細胞分組:① Ad-NC-常氧組:
中國藥理學(xué)通報 2022年1期2022-01-14
- 低氧脅迫對青海湖裸鯉肌肉線粒體呼吸鏈復(fù)合體酶及抗氧化酶活性的影響
組長徑和短徑與常氧組無顯著差異(> 0.05),未見空泡形成。2)線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ和Ⅲ活性在重度低氧脅迫8 h時顯著增加(< 0.05),24 h時降至常氧水平,二者在中度低氧脅迫24 h時顯著增加(< 0.05);復(fù)合體Ⅱ在各組之間均無顯著變化(> 0.05);復(fù)合體Ⅳ在重度低氧脅迫后與常氧組之間無顯著差異,而在中度低氧脅迫24 h時顯著增加(< 0.05)。3)過氧化氫(H2O2)含量在重度低氧脅迫8 h時顯著增加(< 0.05),24 h時降至常
廣東海洋大學(xué)學(xué)報 2021年6期2021-12-24
- 低氧誘導(dǎo)大鼠垂體腺瘤GH3細胞增殖、侵襲和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的機制研究
GH3細胞分為常氧組(不轉(zhuǎn)染HIF-1α-siRNA,氧濃度為19.5%)、低氧組(不轉(zhuǎn)染HIF-1α-siRNA,氧濃度為2.5%)、常氧+siRNA組(轉(zhuǎn)染HIF-1α-siRNA,氧濃度為19.5%)、低氧+siRNA組(轉(zhuǎn)染HIF-1α-siRNA,氧濃度為2.5%)。將GH3細胞置于2.5%胎牛血清+15%馬血清中,在37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。將處于對數(shù)生長期的GH3細胞先接種于6孔板中,常規(guī)培養(yǎng)至融合度為80%,更換新鮮培養(yǎng)液;將3
實用心腦肺血管病雜志 2021年12期2021-12-08
- 補陽還五湯對間歇低氧大鼠心肌miRNA-214/CaMKⅡ信號通路的影響
給藥 隨機分為常氧組、間歇低氧組、補陽還五湯組,每組8只,間歇低氧組與補陽還五湯組每天9∶00~17∶00置于低氧艙中進行間歇性低氧處理制備模型,常氧組在每天同一時間給予常氧,為期8周。低氧艙采用KY-2F型控氧儀進行氧濃度的調(diào)控,通過向低氧艙中循環(huán)充入氮氣和氧氣,達到并維持預(yù)定的氧氣濃度,其中最低氧濃度為5.1 %,最高氧濃度為21.0 %。每一循環(huán)周期分為4個階段,即氧濃度下降期(50 s)、低氧維持期(20 s),氧濃度上升期(30 s)、常氧維持期
江西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報 2021年5期2021-11-11
- 乏氧條件下坎地沙坦增加肺腺癌A549細胞放射敏感性①
液中培養(yǎng)。設(shè)置常氧組、乏氧組和坎地沙坦+乏氧組。常氧組:37℃、5%CO2飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);乏氧組:37℃、1%O2、94%N2、5%CO2的三氣培養(yǎng)箱中培養(yǎng);坎地沙坦+乏氧組:添加坎地沙坦使其終濃度為1.6μmol/L 后置入37℃、1%O2、94%N2、5%CO2的三氣培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。1.2.2 ELISA 檢測AngⅡ的表達 將常氧培養(yǎng)的肺腺癌A549 細胞接種至直徑10 cm 的培養(yǎng)皿,接種細胞密度為50 萬/皿。常氧培養(yǎng)細胞至70%~80%匯
中國免疫學(xué)雜志 2021年12期2021-08-23
- 丹參酮ⅡA在低氧誘導(dǎo)肺動脈高壓中的保護作用
隨機分為3組:常氧組(n=5)、低氧組(n=5)和低氧+TanⅡA組(n=5)。常氧組呼吸正??諝猓脱踅M和低氧+TanⅡA組置于常壓低氧箱內(nèi),采用測氧儀監(jiān)測使箱內(nèi)氧濃度維持在10.0%±0.5%,石灰鈉和無水氯化鈣吸收箱內(nèi)過量的CO2及水蒸氣,將CO2濃度控制在0.5%以內(nèi),每天低氧24 h,連續(xù)2周。2周后低氧+TanⅡA組每天腹腔注射TanⅡA 10 mg/(kg·d),其他兩組小鼠腹腔注射磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered sali
兒科藥學(xué)雜志 2021年8期2021-07-30
- 缺氧及缺氧再復(fù)氧對正常骨組織發(fā)生與發(fā)展的影響
07。隨機分為常氧組(16只)、低氧組(16只)、及低氧轉(zhuǎn)常氧組(8只)。分籠飼養(yǎng)于實驗動物中心SPF動物房及低壓低氧艙,每籠4只,自由攝食、飲水,溫度22~26 ℃,濕度55%~65%,光照時間按照12 h間隔。1.2 實驗主要設(shè)備和軟件 低壓低氧模擬實驗艙(中國貴州風(fēng)雷航空軍械有限公司);SysmexXE-2100全自動血細胞分析儀(日本SYSME東亞公司);Micro-CT(GE);生物力學(xué)試驗機(西安交通大學(xué)航空航天工程學(xué)院機械結(jié)構(gòu)強度與振動國家重
陜西醫(yī)學(xué)雜志 2021年6期2021-06-18
- 4周限制飲食結(jié)合低氧訓(xùn)練對超重和肥胖青少年骨的影響
訓(xùn)練組(簡稱“常氧組”)、低氧訓(xùn)練組(高住高練低練,模擬海拔2 300 m,簡稱“低氧組”)。研究對象基本信息如表1所示。表1 研究對象基本信息Table 1 Basic Information of Subjects1.2 干預(yù)方案1)干預(yù)共持續(xù)4周,每周運動6天。常氧組每天運動和生活均在平原環(huán)境;低氧組每天晚上7點開始居住在模擬2 300 m海拔高度的低氧環(huán)境中,且每日在模擬2 300 m海拔高度的低氧環(huán)境中運動2 h,其他安排與常氧組相同。每天運動安
體育科學(xué) 2021年3期2021-06-02
- 急性低氧脅迫和復(fù)氧恢復(fù)對青田田魚幼魚氧化應(yīng)激和能量代謝的影響
迫實驗前,完成常氧組的取樣(每個實驗桶取3尾,同一實驗桶中3尾魚相同組織混樣),此時的溶氧含量為(7.13±0.28)mg/L,水溫為(25.17±0.41)℃。隨后往水中注入氮氣,待水中溶氧下降到0.5 mg/L左右后,調(diào)節(jié)氮氣和空氣的注入流量來控制水中的溶氧,分別在第2,4和6 h時進行幼魚樣本取樣,每桶取3尾,脅迫期間水中的溶氧含量為(0.46±0.19)mg/L,水溫為(25.37±0.95)℃。待低氧脅迫試驗取樣結(jié)束后,停止氮氣注入并增大空氣注入
淡水漁業(yè) 2020年6期2020-11-27
- 慢性間歇低氧大鼠模型骨髓中基質(zhì)金屬蛋白酶-9及微血管增生的變化*
g),分組為:常氧組(n=9)、缺氧7d組(n=9)組、缺氧14d組(n=9)、缺氧28d組(n=9)。由西安交通大學(xué)實驗動物中心提供,大鼠被飼養(yǎng)在標準的鼠籠中,自由進水進食。制備缺氧組大鼠模型:將缺氧7d組、缺氧14d組、缺氧28d組大鼠在低壓氧艙(青海大學(xué)高原醫(yī)學(xué)中心)內(nèi)飼養(yǎng),模擬條件:模擬海拔高度5 000 m,氧分壓11.3~11.4 kPa,溫度26~28℃,濕度38%~56%,8 h/d,其余時間在正常情況下飼養(yǎng),同一時間點分別連續(xù)處理 7、1
廣東醫(yī)學(xué) 2020年18期2020-09-26
- 低氧微環(huán)境對腦膠質(zhì)瘤細胞增殖、凋亡及HIF-1α 表達的影響
) 培養(yǎng),設(shè)為常氧組(21%O2)和低氧組(1%O2)。以不同密度將低氧組細胞分為低密度組(1 萬個/cm2),中密度組(4.3 萬個/cm2),高密度組(8.5 萬個/cm2) 和極高密度組(12.5 萬個/cm2),于CO2培養(yǎng)箱及三氣培養(yǎng)箱中以相應(yīng)氧濃度及培養(yǎng)基中分別培養(yǎng)24、48、72、96及120 h 后檢測細胞存活與增殖。1.2 MTT 實驗檢測細胞存活及增殖取對數(shù)生長期的T98G 細胞,設(shè)置常氧組(21%O2)、低氧組(1%O2) 及調(diào)零組,
昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2020年7期2020-08-31
- miR-322對大鼠高原性肺動脈高壓的作用及機制研究
機數(shù)字表法分為常氧組、低氧組、空載體組及miR-322沉默組(n=10),剔除實驗過程中死亡大鼠后常氧組10 只,低氧組、空載體組、miR-322沉默組各9只。病毒轉(zhuǎn)染采用氣道轉(zhuǎn)染法[6],轉(zhuǎn)染完成后與低氧組相同方法造模。低壓氧艙模擬6 000 m海拔高度,艙內(nèi)大氣壓47.5 kPa,9.5%~10.1%O2連續(xù)低氧培養(yǎng)21 d,制備低氧性肺動脈高壓大鼠模型[7],常規(guī)飼料喂養(yǎng);常氧組自由呼吸進食,其他條件相同。1.2.2 大鼠處理與取材 大鼠飼養(yǎng)21 d
天津醫(yī)藥 2020年7期2020-08-04
- 低氧下K562細胞向紅系分化進程中GATA-1與miR-451a表達的相關(guān)性研究*
CR結(jié)果顯示,常氧組γ-globin的mRNA表達在48 h與0 h相比無顯著性差異(P>0.05),低氧組48 h其表達量顯著高于0 h(P<0.05);兩組γ-globin的mRNA表達在72 h表達均顯著增高(P<0.05),并且在72 h低氧組顯著高于常氧組(P<0.05),見圖1A。與0 h相比,兩組細胞聯(lián)苯胺染色陽性率均顯著升高(P<0.05),且48和72 h低氧組聯(lián)苯胺染色陽性率均顯著高于常氧組(P<0.01),見圖1B。與0 h相比,兩組
中國病理生理雜志 2020年4期2020-05-26
- 缺氧條件下骨髓間充質(zhì)干細胞對血管內(nèi)皮細胞遷移和管腔形成的影響
Cs培養(yǎng)基作為常氧組的CM、血管內(nèi)皮細胞的正常培養(yǎng)基作為對照組的CM。1.2.4 Transwell實驗采用24孔Transwell小室(8μm)進行遷移測定。將RF/6A(2×104/孔)和HUVECs(1×105/孔)的細胞懸浮液分別接種到Transwell上室中,并將500μL不同組的CM添加到下室,繼續(xù)在培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)24h。然后將小室置于4%多聚甲醛中20min,小心擦拭小室上腔未遷移的細胞,繼續(xù)將小室用結(jié)晶紫染色15min。PBS洗3次后在顯
國際眼科雜志 2020年1期2020-01-08
- 持續(xù)性低氧大鼠肝臟HIF-2α信號通路變化及對血糖的影響※
r大鼠隨機分為常氧組(n=16)和低氧組(n=16),常氧組在海拔200 m左右的常氧環(huán)境下飼養(yǎng),低氧組在模擬海拔5 000 m的低壓氧艙中飼養(yǎng)。在實驗的第1 w和4 w各取8只,禁食12 h后(不禁水)行經(jīng)腹腔注射葡萄糖耐量試驗(intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT),評估大鼠糖耐量狀態(tài)。于次日晨,麻醉處死大鼠,留取肝臟進行Western Blot檢測,分析HIF-2α、Akt、P-Akt、Gsk-3β
中國高原醫(yī)學(xué)與生物學(xué)雜志 2018年2期2018-12-14
- 缺氧誘導(dǎo)因子-2α對乳腺癌細胞多藥耐藥的影響
胞分為對照組、常氧組和缺氧組,各組細胞置于含體積分數(shù)10%胎牛血清、100 kU·L-1青霉素和 100 mg·L-1鏈霉素的高糖達爾伯克改良伊格爾培養(yǎng)基中,放入37 ℃、含體積分數(shù)5%CO2的恒溫箱中常規(guī)培養(yǎng)24 h后,常氧組細胞更換含生理鹽水的培養(yǎng)基;缺氧組細胞更換含CoCl2的培養(yǎng)基,CoCl2采用生理鹽水稀釋至終濃度為100 μmol·L-1;對照組細胞不處理。1.3qRT-PCR檢測各組細胞中HIF-2αmRNA的表達待細胞生長至70%融合時,按
新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報 2018年11期2018-11-27
- 17β-雌二醇/微小核糖核酸-21信號通路抑制低氧性肺動脈高壓肺血管重構(gòu)的機制研究
后1周隨機分入常氧組、常氧+E2組、低氧組、低氧+E2組,每組8只。兩個E2干預(yù)組大鼠每日皮下注射E2 20 μg/kg,余組大鼠注射等量生理鹽水。兩個低氧組大鼠置于氧氣濃度為(10.0±0.5)%的低氧環(huán)境動物試驗箱中,以鈉石灰和無水氯化鈣吸收多余的CO2和水分,控制CO2濃度<0.5%,每天持續(xù)低氧24 h,兩個常氧組置于正??諝庵酗曫B(yǎng)外,余飼養(yǎng)條件同低氧組。細胞實驗:將hPASMC在專用培養(yǎng)液(配方:2% FBS、0.5% SMCGS、0.5%青霉素
中國循環(huán)雜志 2018年11期2018-11-24
- let-7a調(diào)控自噬對缺氧狀態(tài)下原發(fā)性肝癌HCCLM3細胞增殖的影響*
代。分組設(shè)計:常氧組:取HCCLM3細胞懸液(細胞數(shù)為5×106/ml)10 ml,于含10%胎牛血清的DMEM 培養(yǎng)液中,置于 CO2培養(yǎng)箱(37℃、5%CO2、20%O2);缺氧組:取 HCCLM3細胞液(細胞數(shù)為5×106/mL)10 mL于含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液中,置于 CO2培養(yǎng)箱(37℃、5%CO2、2%O2、93%N2);缺氧let-7a組:取轉(zhuǎn)染let-7a-mimics的HCCLM3細胞液(細胞數(shù)為5×106/ml)10 ml于
實用肝臟病雜志 2018年5期2018-09-20
- 丹參酮ⅡA磺酸鈉抑制低氧誘導(dǎo)的大鼠肺動脈平滑肌細胞增殖及其機制
中,將細胞分為常氧組,常氧+STS組(5、10、20 ng/mL)、低氧組(3%O2)、低氧+STS組(5、10、20 ng/mL)。在STS作用機制實驗(細胞通路實驗)中,行熒光定量PCR檢測時,將PASMC分為常氧組、低氧組、低氧+STS組(10 ng/mL);行蛋白質(zhì)印跡檢測時,將PASMC分為常氧組、低氧組、低氧+STS組(10 ng/mL)、低氧+RAM組(20 nmol/L)。1.3 CCK-8法檢測細胞增殖能力待PASMC生長至80%~90%
江蘇大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版) 2018年3期2018-06-08
- SphK1抑制劑二甲基鞘氨醇抑制肺動脈平滑肌細胞增殖及遷移的作用及其可能機制
驗 將細胞分為常氧組、低氧組、低氧+DMS(10 μmol·L-1)組。常氧組置于37℃、5% CO2、21% O2,低氧組置于37℃、5% CO2、1% O2培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)。培養(yǎng)6、24、48、72 h后,按MTT試劑盒說明書檢測各組細胞的增殖情況。1.2.2流式細胞儀檢測細胞凋亡 常氧組、低氧組和低氧+DMS(10 μmol·L-1)組細胞培養(yǎng)24 h后,參照細胞凋亡檢測試劑盒的說明書進行操作,以流式細胞儀檢測PASMCs的凋亡。1.2.3劃痕法檢測細
中國藥理學(xué)通報 2018年6期2018-06-08
- 亞甲藍對高原低氧腦損傷的保護作用研究
6小鼠隨機分為常氧組、低氧組和低氧+亞甲藍組,其中低氧+亞甲藍組按體質(zhì)量設(shè)0.1、0.2、0.5、1.0和2.0 mg/kg[8]5個MB濃度組,共計7個組,每組5只。低氧組和低氧+亞甲藍組小鼠在低壓低氧前30 min按體質(zhì)量0.5 mg/kg[4]給予腹腔注射LPS;常氧組小鼠給予腹腔注射等體積生理鹽水作為對照;30 min后,低氧+亞甲藍組小鼠給予MB注射,隨后將低氧組和低氧+亞甲藍組小鼠置于低壓低氧實驗動物艙,以10 m/s的上升速度模擬海拔6000
- 低氧對滋養(yǎng)細胞HIF-1α、BNIP3表達及自噬和侵襲能力的影響
h后分為3組:常氧組在正常條件下培養(yǎng)細胞,缺氧組加入終濃度為200 μmol/L 的CoCl2,3-MA+缺氧組在缺氧組基礎(chǔ)上加入終濃度為5 mmol/L 3-MA。繼續(xù)培養(yǎng)24 h后進行1.3和1.4的檢測。1.3Real-timePCR檢測HIF-1α、BNIP3mRNA的表達量Trizol一步法提取常氧組和缺氧組細胞總RNA,按照逆轉(zhuǎn)錄試劑盒說明合成cDNA,置于熒光定量PCR儀進行擴增,擴增體系為20 μL。擴增條件為95 ℃預(yù)變性60 s;95
鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版) 2018年2期2018-04-02
- 氯化鋰通過抑制糖原合酶激酶3β維持缺氧心肌的縫隙連接
/6J小鼠分為常氧組、缺氧組、常氧對照組、缺氧+生理鹽水組和缺氧+氯化鋰組。缺氧組采用10%氧濃度缺氧4周。缺氧+生理鹽水組和缺氧+氯化鋰組分別腹腔注射生理鹽水和氯化鋰。用電生理和心導(dǎo)管檢查,評價心律失常情況、心率和射血分數(shù)。用免疫熒光觀察連接蛋白43(Cx43)的分布情況,蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測Cx43、磷酸化糖原合酶激酶3β(p-GSK-3β)和糖原合酶激酶3β(GSK-3β)的水平。結(jié)果與常氧組比,缺氧組小鼠心率較快[(448
重慶醫(yī)學(xué) 2017年34期2018-01-05
- 低氧預(yù)處理對臍帶間充質(zhì)干細胞表型、增殖及神經(jīng)營養(yǎng)因子分泌功能的影響
機分為低氧組和常氧組,分別置于氧濃度為5%、21%的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6天。取對數(shù)生長期的兩組細胞,采用流式細胞術(shù)檢測CD44、CD45、CD90、HLA-DR表達,細胞免疫熒光法檢測CD34及層粘連蛋白、波形蛋白表達,實時熒光定量PCR法檢測腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、肝細胞生長因子(HGF)、睫狀節(jié)神經(jīng)細胞營養(yǎng)因子(CNTF)mRNA表達。兩組培養(yǎng)1~6天進行細胞計數(shù),并采用CCK-8法檢測細胞增殖活性。結(jié)果兩組均高表達
山東醫(yī)藥 2017年32期2017-10-10
- HIF-2α基因沉默對人肝癌細胞株 HepG2增殖能力的影響
白表達顯著高于常氧組和低氧+HIF-2α siRNA組(P<0.05);細胞生長曲線結(jié)果顯示:低氧組、低氧+Control siRNA組的光密度值顯著高于常氧組和低氧+HIF-2α siRNA組(P<0.05);細胞周期結(jié)果顯示:低氧組、低氧+Control siRNA組HepG2細胞在DNA合成前期(G0/G1期)細胞比率顯著低于常氧組和低氧+HIF-2α siRNA組,合成期(S)及合成后期(G2/M)細胞比率顯著高于常氧組和低氧+HIF-2α siR
胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志 2017年8期2017-09-12
- 硫化氫對實驗性高原肺水腫大鼠呼吸膜通透性的影響*
試劑(PPG)常氧組、試劑(PPG)低氧組。用面罩低氧方式構(gòu)建大鼠實驗性高原肺水腫模型。用腹腔注射PPG抑制內(nèi)源性H2S的產(chǎn)生。用ELISA法檢測肺組織中EB含量和支氣管肺泡灌洗液(BALF)中TP含量,光鏡下觀察肺組織的病理學(xué)改變。結(jié)果 PPG常氧組中BALF的TP含量明顯高于常氧對照組(P高原肺水腫 硫化氫 肺呼吸膜通透性 大鼠有學(xué)者認為,高原肺水腫(HAPE,high altitude pulmonary edema)的形成并非僅僅是肺動脈壓力增高導(dǎo)
中國高原醫(yī)學(xué)與生物學(xué)雜志 2017年2期2017-08-07
- 低氧增強骨髓間充質(zhì)干細胞增殖維持分化潛能
氧組)及常氧(常氧組)培養(yǎng),觀察BMMSCs的形態(tài)、增殖能力及成骨、成脂分化能力。結(jié)果 低氧組BMMSCs保持其長梭形,魚群樣分布,增長狀態(tài)良好,常氧組BMMSCs形態(tài)呈多角形或扁平狀,低氧組BMMSCs數(shù)量及生長速率較常氧組增加(P< 0.05),且低氧組BMMSCs具有成骨、成脂分化能力。結(jié)論 低氧能促進BMMSCs的體外增殖且維持其多向分化潛能。低氧;骨髓間充質(zhì)干細胞;增殖;多向分化骨髓間充質(zhì)干細胞(bonemarrowmesenchymalstem
中國比較醫(yī)學(xué)雜志 2017年7期2017-08-04
- 缺氧肺動脈平滑肌細胞中PKCα/c-fos、Bax/Bcl-2表達變化及其對增殖和凋亡的影響*
ASMCs分為常氧組(5%CO2、21%O2、74%N2)和低氧組(5%CO2,2% O2,93%N2) 24 h,48 h。通過氮藍四唑鹽(MTT)比色法測定PASMCs的增殖水平,以流式細胞儀Annexin V-FITC/PI染色法檢測細胞凋亡率,并通過用RT-PCR和Western blot法檢測PKCα/c-fos、Bax/Bcl-2基因和蛋白表達的變化。實驗至少重復(fù)3次,每組設(shè)置至少3個復(fù)孔。結(jié)果:低氧24 h和48 h組PASMCs增殖明顯,與
中國應(yīng)用生理學(xué)雜志 2017年3期2017-06-12
- 低氧反復(fù)沖刺訓(xùn)練對籃球運動員專項速度耐力的影響
員分為低氧組和常氧組,每組各8人。低氧組和常氧組分別在模擬海拔3000米的低氧環(huán)境中和常氧環(huán)境中用無氧功率自行車進行反復(fù)沖刺訓(xùn)練,每周2次,共計4周。反復(fù)沖刺訓(xùn)練前后,兩組受試者在常氧環(huán)境中進行折返跑測試和Wingate無氧功測試,折返跑測試后分別在即刻、3 min、5 min、7 min、9 min等時間點進行血液采集,測量血乳酸值。記錄折返跑成績、Wingate無氧功測試的相對平均功率,并對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。結(jié)果:與訓(xùn)練前相比,4周反復(fù)沖刺訓(xùn)練后,低氧
中國運動醫(yī)學(xué)雜志 2017年5期2017-06-09
- 脂聯(lián)素對低氧條件下大鼠肺微動脈內(nèi)皮細胞NO生成的促進作用及其機制
ECs分4組,常氧組(210 ml/L O2,37 ℃);低氧組(20 ml/L O2);低氧+APN組(20 ml/L O2+APN 1 μg/ml),低氧+APN+L-NAME組(20 ml/L O2,+APN 1 μg/ml+L-NAME 1 μg/ml)處理,各組細胞同時處理(加藥)后,培養(yǎng)12 h收集上清,硝酸還原法測NO濃度,RT-PCR測定eNOS mRNA的基因表達Western blot檢測AMPK/p-AMPK、PI3K/p-PI3K、
山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2017年5期2017-06-07
- 間歇式低氧對主動脈弓縮窄模型小鼠腸道菌群的影響
為3組,假手術(shù)常氧組(C組),主動脈弓縮窄模型常氧組(TC組),主動脈弓縮窄模型低氧組(TH組),每組各6只。間歇式低氧的條件為氧濃度10.5%,每天8 h低氧,16 h常氧,交替進行,連續(xù)10 d。獲取小鼠盲腸糞便中細菌DNA,經(jīng)16 S rDNA測序檢測小鼠盲腸糞便中微生物組成,應(yīng)用微生物生態(tài)學(xué)定量觀察進行生物信息學(xué)分析。結(jié)果 主動脈弓縮窄模型常氧組與假手術(shù)常氧組、主動脈弓縮窄模型低氧組相比,互營桿菌科顯示出更低的豐度。TC組與C組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義
武警醫(yī)學(xué) 2016年11期2016-12-17
- 低氧環(huán)境對臍帶間充質(zhì)干細胞相關(guān)細胞因子表達的影響
20% O2(常氧組)和 5% O2(低氧組)環(huán)境中培養(yǎng),于 8、24、32、48、56、72 h ELISA 法檢測培養(yǎng)前及培養(yǎng)后上清液中 HGF、IGF-1、SDF-1、VEGF、bFGF、SCF、G-CSF 的濃度。結(jié)果 低氧組培養(yǎng)上清液中 HGF、SDF-1、SCF、G-CSF 的濃度于培養(yǎng)后 72 h 明顯高于常氧組(P < 0.05);VEGF 的濃度于培養(yǎng)后 56 h 明顯高于常氧組(P < 0.05);bFGF 濃度于培養(yǎng)后 32 h 明顯
中國醫(yī)藥生物技術(shù) 2016年5期2016-11-09
- 缺氧誘導(dǎo)因子1α調(diào)控claudin-1蛋白表達對腸道粘膜屏障功能的影響
通透性。結(jié)果與常氧組比較,缺氧可明顯增加HIF1α分泌,減少claudin-1蛋白表達,減小跨上皮電阻(P缺氧誘導(dǎo)因子1α;Claudin-1;缺氧;腸道屏障功能【Abstract】Objective To observe the effects of Human hypoxia-inducible factor 1α (HIF1α) on claudin-1 expression and intestinal epithelial barrier fun
湖北民族大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版) 2016年2期2016-08-02
- 缺氧誘導(dǎo)因子-1α對結(jié)直腸癌細胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化及侵襲遷移的影響
氧組)和常氧(常氧組)處理,Transwell侵襲和劃痕實驗檢測2組2種細胞的侵襲、遷移情況;Western blot實驗和RT-PCR實驗檢測2組HIF-1α、E-cadherin及Vimentin的蛋白及mRNA表達水平。結(jié)果50 mg/L CoCl2作用48 h時2種細胞均出現(xiàn)明顯的形態(tài)改變。2組HCT116、HT-29細胞的HIF-1α蛋白表達水平隨CoCl2濃度增加均呈先增后減趨勢,50 mg/L為最適宜濃度(P<0.05)。0~96 h時2種細
天津醫(yī)藥 2016年5期2016-07-13
- 雌激素及其代謝產(chǎn)物對去勢低氧肺動脈高壓大鼠烷烴單加氧酶和低氧誘導(dǎo)因子-1α表達的影響
隨機分為6組:常氧組(n=10),常氧+E2組(n=10),常氧+2ME組(n=10),低氧組(n=10),低氧+E2組(n=10),低氧+2ME組(n=10)。低氧組持續(xù)低氧(24 h,8周);2ME組自造模之日起,每日皮下注射2ME(240 μg /kg);E2組每日皮下注射E2(20 μg/kg)。連續(xù)飼養(yǎng)8周,以建立低氧性肺動脈高壓模型。測量平均肺動脈壓(mPAP)后放血處死大鼠,觀察右心室肥厚指數(shù)(RVHI),蘇木素-伊紅(HE)染色觀察肺小動脈
中國循環(huán)雜志 2015年9期2015-12-16
- 低氧預(yù)處理對人牙髓干細胞增殖和表達血管生成因子的影響
DPSCs,按常氧組(210 mL/L O2)和低氧組(30 mL/L O2)分別培養(yǎng),流式細胞術(shù)檢測細胞表面標志物;MTT檢測細胞增殖;Live/Dead 染色檢測細胞活性;qRT- PCR和ELISA檢測VEGF的表達量。結(jié)果: hDPSCs間充質(zhì)干細胞表面標志物 CD29、CD44、CD90表達為強陽性,而造血干細胞表面標志物CD34、CD45及內(nèi)皮細胞表面標志物CD31表達均為陰性;低氧組與常氧組均未發(fā)生細胞壞死現(xiàn)象;低氧組hDPSCs增殖能力和h
牙體牙髓牙周病學(xué)雜志 2015年2期2015-11-21
- EGFR 對血管生成擬態(tài)的誘導(dǎo)作用及其相關(guān)機制
能力均顯著高于常氧組(P<0.01)。Western blot顯示缺氧組中EGFR、AKT、PI3K蛋白的表達顯著高于常氧組。結(jié)論缺氧可誘導(dǎo)EGFR/AKT/PI3K信號通路活化,進而誘導(dǎo)血管生成擬態(tài)的形成,EGFR在血管生成擬態(tài)的形成過程中起著十分重要的作用。血管生成擬態(tài);缺氧;膠質(zhì)瘤;EGFR/AKT/PI3K信號通路血管生成擬態(tài)(vasculogenic mimicry,VM)是近年來發(fā)現(xiàn)的存在于惡性腫瘤中的一種獨特的血液供應(yīng)方式。它是由腫瘤細胞經(jīng)過
西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版) 2015年6期2015-06-23
- α-硫辛酸對H9c2心肌細胞低氧及低氧/復(fù)氧損傷的保護作用及其機制探討
驗兩部分,分成常氧組、低氧組或低氧/復(fù)氧組、LA組、乙醛脫氫酶抑制劑異黃酮苷(Daidzin)組(Daidzin組)、二甲亞砜(DMSO)溶劑對照組(DMSO組)。采用噻唑藍(MTT)比色法檢測心肌細胞存活率;微量酶標法測定乳酸脫氫酶(LDH)活性;ELISA法檢測心肌細胞乙醛脫氫酶2(ALDH2)活性;硫代苯巴比妥酸法檢測丙二醛(MDA)水平。結(jié)果與常氧組比較,低氧組及低氧/復(fù)氧組細胞存活率均下降(P<0.01),LDH活性及MDA含量均升高(P<0.0
安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2015年7期2015-06-01
- 不同時間持續(xù)缺氧對3T3-L1脂肪細胞脂肪因子基因表達的影響
分為6組,設(shè)置常氧組和缺氧組。常氧組為對照組(缺氧0 h),置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。缺氧組為實驗組,將細胞分別置于37℃、1%O2、5%CO2、94%N2下分別孵育4、12、24、48 h和72 h。每組6孔。實驗重復(fù)3次。1.2.3 實時定量PCR測定脂肪細胞缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)、葡萄糖轉(zhuǎn)運子1(GLUT-1)mRNA水平 按照總RNA提取試劑盒步驟提取上述脂肪細胞總RNA,紫外分光光度計檢測確定總RNA濃度及純度。嚴格按照cDN
天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2015年1期2015-03-02
- 低壓低氧對SD大鼠肺動脈壓及肺組織OPN表達的影響
隨機分成5組:常氧組以及低氧(低壓氧艙,5 000 m海拔) 1 d組、7 d組、14 d組和21 d組,測定平均肺動脈壓(mPAP)和右心室肥厚指數(shù)[RV/(LV + S)]; Western blot法檢測肺組織中OPN表達。結(jié)果:低氧各組動物mPAP均高于常氧組,14 d組>21 d組,7 d組>1 d組;低氧7 d、14 d、21 d組動物RV/(LV + S)逐漸增高; Western blot結(jié)果示低氧各組肺組織OPN水平高于常氧組,7 d組>
中國病理生理雜志 2015年10期2015-01-26
- 低壓低氧對大鼠bFGF和VEGF表達的影響
D大鼠隨機分為常氧組以及低氧1 d、7 d、14 d、21 d和30 d組(n =10)。除常氧組外,余5組大鼠置于模擬海拔5 000米的低壓氧艙中飼養(yǎng),各時點取血清,運用ELISA方法檢測血清中bFGF和VEGF含量。結(jié)果:各低氧組血清bFGF的表達均高于常氧組(P<0. 05),隨低氧時間的延長,血清bFGF表達量呈逐漸升高趨勢(P<0. 05) ;低氧1 d,血清VEGF表達明顯升高(P<0. 05),低氧時間延長,血清VEGF含量呈逐漸下降趨勢(P
中國病理生理雜志 2015年10期2015-01-26
- 15-LOX/15-HETE對Kv通道的抑制在缺氧誘導(dǎo)的腦動脈收縮中的作用
A組為正常細胞常氧組(對照組):將細胞放入37℃,5%CO2及95%O2的常規(guī)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h;B組為正常細胞缺氧組:將細胞放入3%O2,5%CO2和92%N2的缺氧箱中培養(yǎng)48 h;C組為15-LOX基因過表達細胞常氧組:對細胞上的15-LOX進行基因過表達,然后放入常氧箱中培養(yǎng)48 h;D組為15-LOX基因敲除細胞缺氧組:對細胞上的15-LOX進行基因敲除,然后放入缺氧箱中培養(yǎng)48 h。1.2.3 15-LOX基因過表達及CASMC 基因敲除15
中國卒中雜志 2015年8期2015-01-23
- TG2在缺氧條件下骨肉瘤MG-63細胞凋亡中的作用及可能機制
培養(yǎng)模型,分成常氧組、單純?nèi)毖踅M、對照siRNA缺氧組、TG2 siRNA缺氧組4組,觀察比較各組在培養(yǎng)不同時相(6、12、24、48、72 h)骨肉瘤MG-63細胞中TG2、Caspase-3表達、胞核和胞漿細胞色素C的變化及細胞凋亡率。微量滴定板法檢測TG2的活性;半定量RT-PCR方法檢測TG2的mRNA水平;Western blot檢測TG2、Caspase-3及細胞色素C蛋白表達情況;免疫組化(SP法)檢測TG2蛋白在細胞內(nèi)的分布;流式細胞儀檢測
中國生化藥物雜志 2014年9期2014-09-14
- 低氧對人喉鱗癌Hep-2細胞凋亡的影響及其機制探討
長期后隨機分為常氧組及低氧組。低氧培養(yǎng)實驗條件為 2%O2、5%CO2、93%N2、37 ℃,具體實驗裝置制作見參考文獻[2];常氧組原環(huán)境繼續(xù)培養(yǎng)。24 h后收集兩組細胞。每組實驗重復(fù)5次。1.2.2 細胞凋亡觀察 采用流式細胞儀(FCM)。檢測時隨機抽取待測標本的一部分細胞,將這部分細胞作為隨機樣本進行分析;首先測出樣本細胞總數(shù),再測得其中凋亡細胞占該樣本細胞總數(shù)的百分率,即細胞凋亡率。1.2.3 HIF-1α、LOX 蛋白檢測 采用 Western
山東醫(yī)藥 2014年8期2014-05-08
- 低氧聯(lián)合高脂飲食對SD大鼠心肌內(nèi)皮型一氧化氮合酶/一氧化氮的影響*
每組20只):常氧組(南京,海拔10米)、低氧組(模擬海拔5000米,低壓氧艙)、低氧聯(lián)合高脂飲食組(模擬海拔5000米,低壓氧艙),低氧聯(lián)合高脂飲食組大鼠灌服脂肪乳劑(10 ml/(kg.d),1次/天),另外兩組大鼠灌服等體積生理鹽水,普通飲食。于實驗4周末取材,抽取大鼠外周靜脈血置于乙二胺四乙酸二鉀(EDTAK2)抗凝管,留取心肌標本于-80℃冰箱保存。主要儀器和試劑:低壓氧艙室(貴州風(fēng)雷航空機械有限公司,DYC-3000),BC-2300全自動血細
中國循環(huán)雜志 2014年9期2014-03-03
- 不同環(huán)境下有氧運動對超重和肥胖青少年體重與體脂含量的影響
高原組)、平原常氧組(簡稱常氧組)。根據(jù)中華人民共和國衛(wèi)生部疾病控制司編制的《中國成人超重和肥胖癥預(yù)防控制指南》定義:BMI(體重指數(shù))24~27.9kg/m2屬于超重,BMI≥28kg/m2屬于肥胖,選擇受試者時要求BMI不小于24kg/m2(表1)。表1 本研究研究對象基本信息一覽表Table 1 General Information of Subjects1.2 日常安排、運動及飲食控制日常安排:各組受試者在實驗期間均采取集中封閉式管理,中途不能回
體育科學(xué) 2013年11期2013-10-18
- Gax基因?qū)Φ脱跣苑蝿用}內(nèi)皮細胞增殖、凋亡和周期的影響
染常氧對照組(常氧組)、未轉(zhuǎn)染低氧處理組(低氧組)、Ad?βGal轉(zhuǎn)染后低氧處理組(Ad?βGal+低氧組)、Ad?Gax轉(zhuǎn)染后低氧處理組(Ad?Gax+低氧組)。在常氧和低氧處理1、3、6 h和12 h后,3H?TdR摻入法測PAECs增殖、流式細胞術(shù)測細胞周期和凋亡率。結(jié)果與常氧組比較,低氧組和Ad?βGal+低氧組PAECs3H?TdR摻入量均顯著升高(P均<0.01),低氧6 h最大;Ad?Gax+低氧組與常氧組比較均顯著升高(P均<0.01),與
實用老年醫(yī)學(xué) 2013年12期2013-03-03
- 不同時間缺氧對脂肪細胞炎癥因子表達的影響
滴。將細胞分為常氧組37℃1%O 5%CO 94%N2下孵育時間為4、8和16 h。1.2.2 免疫印跡檢測葡萄糖轉(zhuǎn)運子1(GLUT1)的表達 常氧或缺氧培養(yǎng)脂肪細胞后,裂解細胞,測蛋白后取40μg裂解液,65℃加熱15min,7.5%(v/v)SDS-PAGE電泳,免疫印跡檢測GLUT1,一抗用抗GLUT1的兔抗體,二抗用偶聯(lián)HRP的山羊抗兔抗體,以Actinin1作內(nèi)參,增強化學(xué)發(fā)光底物試劑盒檢測,曝光,應(yīng)用NIH Image J軟件分析定量。1.2.
天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2012年1期2012-10-20
- 不同低氧分壓對SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞增殖分化的影響*
驗分為低氧組和常氧組(21%),低氧組再分2%、4%、6%、8%氧分壓組(分別為低氧1組、低氧2組、低氧3組、低氧4組)。取第4代MSCs消化后,用含10%胎牛血清α-MEM培養(yǎng)基配制成4×104個/mL的細胞懸液。將細胞接種于96孔板中,每孔加入200 μL細胞懸液,每組每個時間點設(shè)5個復(fù)孔。按照分組情況,將實驗組細胞放置于預(yù)先設(shè)置好氧分壓的三氣培養(yǎng)箱中,常氧組細胞放置于5%CO2孵箱中靜置培養(yǎng)。3~4天換液1次。在1、3、5、7、9 d 5個時間點,取
重慶醫(yī)學(xué) 2012年26期2012-01-03
- 低氧誘導(dǎo)因子-1α在低氧促成肌細胞增殖中的作用*
隨機分為兩組:常氧組(20%O2)和低氧組(10%O2),培養(yǎng) 12 h、24h、36 h 時 ,將兩組細胞分別消化分散離心,用70%冰乙醇-20℃固定24h,洗滌溫育后加入5 mg/100ml溴化乙錠染色,流式細胞儀檢測并分析結(jié)果。1.5 RT-PCR方法檢測 SkMs HIF-1α mRNA表達將分離純化的SkMs按一定密度接種在培養(yǎng)皿中,將細胞隨機分為兩組:常氧組(20%O2)和低氧組(10%O2),培養(yǎng) 2 h 、4h 、8 h 、12 h 、16
中國應(yīng)用生理學(xué)雜志 2010年2期2010-05-24