無(wú)義
- Nature Biotechnology報(bào)道北京大學(xué)藥學(xué)院夏青教授團(tuán)隊(duì)開(kāi)創(chuàng)性應(yīng)用tRNA-酶治療無(wú)義突變罕見(jiàn)病的進(jìn)展
tRNA-酶治療無(wú)義突變罕見(jiàn)病的進(jìn)展[Restoration of dystrophin expression in mice by suppressing a nonsense mutation through the incorporation of unnatural amino acids. Nat Biomed Eng， 2022, 6(2)： 195-206]。tRNA是一類小的非編碼 RNA，在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中充當(dāng)氨基酸運(yùn)輸載體的角色，負(fù)責(zé)將
- 長(zhǎng)鏈非編碼RNA POIR對(duì)多次傳代后牙周膜干細(xì)胞成骨分化功能的影響
不經(jīng)任何處理)、無(wú)義序列轉(zhuǎn)染對(duì)照組(轉(zhuǎn)染sh-NC質(zhì)粒)和lncRNA POIR下調(diào)組(轉(zhuǎn)染sh-lncRNA POIR質(zhì)粒)。將sh-NC質(zhì)粒、sh-lncRNA POIR質(zhì)粒分別和Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染試劑(Invitrogen)混勻，室溫靜置20 min分別加入無(wú)義序列轉(zhuǎn)染對(duì)照組細(xì)胞和lncRNA POIR下調(diào)組細(xì)胞中，在37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h用于后續(xù)成骨分化相關(guān)研究，包括ALP染色、ALP活性、茜素紅染色和RT
山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2022年6期2022-08-04
- 凝血因子X(jué)I基因變異致下消化道出血病因分析
一個(gè)由FXI基因無(wú)義變異導(dǎo)致的遺傳性凝血因子X(jué)I缺陷癥患者行內(nèi)鏡下直腸息肉摘除術(shù)后出現(xiàn)下消化道異常出血進(jìn)行臨床資料和基因變異分析，探討FXI基因變異與治療后下消化道異常出血的關(guān)系。1 對(duì)象和方法1.1 研究對(duì)象 選擇2021年8月于溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科收治的1例內(nèi)鏡下直腸息肉摘除術(shù)后出現(xiàn)下消化道異常出血患者作為研究對(duì)象。調(diào)查患者及家系其他成員共3代5人，均無(wú)自發(fā)性出血傾向，家系遺傳圖譜見(jiàn)圖1。選取100名20～58歲的體檢健康者建立實(shí)驗(yàn)室凝血指
溫州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2022年4期2022-04-30
- AA野生種花生Ty1-copia類反轉(zhuǎn)座子RT基因的克隆與序列分析
中的19條發(fā)生了無(wú)義突變，A. duranensis（PI219823）要比A. duranensis（PI262133）的無(wú)義突變率高。（4）氨基酸序列間相似性為4.7%～100%，呈現(xiàn)高度異質(zhì)性。（5）各家族中代表序列的蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)在整體構(gòu)型上一致，但在螺旋結(jié)構(gòu)數(shù)、折疊結(jié)構(gòu)數(shù)、轉(zhuǎn)角數(shù)和氫鍵數(shù)上存在較大差別。（6）序列間保守基序總體一致，但也存在一定變異，呈現(xiàn)一定異質(zhì)性;系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)將68條序列分為10類，大部分序列都聚在A和B兩大類中。（7）另有部分A
廣西植物 2022年1期2022-03-17
- 干預(yù)HSF1影響MDR1的表達(dá)逆轉(zhuǎn)結(jié)直腸癌HCT-8細(xì)胞株耐藥的實(shí)驗(yàn)分析
異性慢病毒序列、無(wú)義序列組慢病毒及轉(zhuǎn)染增強(qiáng)試劑，均由上海吉?jiǎng)P公司設(shè)計(jì)提供；HSF1、MDR1、Cyclin D1、MMP-2與BCL-2抗體，均購(gòu)自美國(guó)Abcam公司；辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔多克隆IgG抗體II抗購(gòu)自福州邁新公司；CCK-8購(gòu)自日本同仁研究所；吉姆薩染液購(gòu)自北京索萊寶公司；Transwell雙層細(xì)胞培養(yǎng)板購(gòu)自美國(guó)Corning公司；Western blot實(shí)驗(yàn)中凝膠試劑盒、RIPA細(xì)胞裂解液等試劑盒，均購(gòu)自江蘇碧云天公司；RT-PCR實(shí)
臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志 2021年8期2021-09-22
- 精源性卵母細(xì)胞激活因子的相關(guān)機(jī)制研究進(jìn)展
C2結(jié)構(gòu)域的3個(gè)無(wú)義突變(p.I489F，p.S500L，p.R553P)和位于C端蛋白結(jié)構(gòu)域外的一個(gè)無(wú)義突變（p.M578T）。所有突變都通過(guò)silico分析進(jìn)行評(píng)估，大多數(shù)突變也進(jìn)行了功能分析[38-48]，見(jiàn)表1。表1 PLCZ1突變文獻(xiàn) cDNA改變 外顯子位點(diǎn) 蛋白質(zhì)改變 結(jié)構(gòu)域位置 突變類型 純合性PLCζ表達(dá)水平及位置Silico分析 功能性分析[31] c.736C>T 7 p.L246F X 無(wú)義突變 純合 表達(dá)降低位置改變 損傷 /[2
中國(guó)男科學(xué)雜志 2021年3期2021-08-05
- 基于網(wǎng)絡(luò)公開(kāi)測(cè)序數(shù)據(jù)的K326煙草線粒體基因組RNA編輯位點(diǎn)的鑒定與分析
新的終止密碼子（無(wú)義突變）或?qū)е陆K止密碼子丟失的位點(diǎn)共計(jì)62 個(gè)（表2）；40 個(gè)位點(diǎn)（占所有位點(diǎn)的1.0%）位于8 個(gè)RNA 基因（tRNA）（表1）；2 898 個(gè)位點(diǎn)位于基因間區(qū)，占所有位點(diǎn)的68.8%。在線粒體編碼的153 個(gè)蛋白編碼基因中，99 個(gè)基因（占所有蛋白編碼基因的64.7%）存在RNA 編輯位點(diǎn)；線粒體編碼的27 個(gè)RNA 基因中在8 個(gè)基因（占所有RNA 基因的29.6%）上發(fā)現(xiàn)了RNA 編輯位點(diǎn)。蛋白編碼基因ccmFN、mat-R、
煙草科技 2021年6期2021-06-24
- 針對(duì)《GLDC基因復(fù)合雜合突變致非經(jīng)典型非酮性高甘氨酸血癥家系的臨床和遺傳學(xué)分析》一文讀者提出問(wèn)題的反饋
突變體，突變一為無(wú)義突變（表達(dá)提前終止），突變二為錯(cuò)義突變，在Western blot結(jié)果中不應(yīng)該是大小相同的條帶。（2） 原文中多處有“c.1296C＞G（p.Ser419 STer）”寫(xiě)法，其中STer是什么意思？是否正確？2 作者回答感謝讀者對(duì)我們文章的關(guān)注，并指出文章存在的不足之處。針對(duì)讀者提出的問(wèn)題，我們已核實(shí)并做出如下回復(fù)?；卮穑?）：經(jīng)讀者問(wèn)題提醒，我們翻看了預(yù)實(shí)驗(yàn)的凝膠電泳圖（圖1），發(fā)現(xiàn)考馬斯亮藍(lán)染色后，突變一泳道在紅色箭頭處有一蛋白表達(dá)
中國(guó)當(dāng)代兒科雜志 2021年6期2021-06-16
- Duchenne 型肌營(yíng)養(yǎng)不良癥治療研究進(jìn)展
素、外顯子跳躍、無(wú)義突變通讀治療、Myostatin 抑制劑、上調(diào)Utrophin、CRISPR/Cas9 等，本文將對(duì)上述治療方法進(jìn)行綜述。1 糖皮質(zhì)激素糖皮質(zhì)激素是目前唯一被循證醫(yī)學(xué)證實(shí)有效的藥物。它可以刺激成肌細(xì)胞增殖，抑制肌肉蛋白分解，進(jìn)而改善肌肉的功能和力量[3]。與未經(jīng)治療的患者比較，糖皮質(zhì)激素的使用可使患者行走能力平均延長(zhǎng)2～5 年[4]。目前指南[5]推薦的最佳劑量為潑尼松0.75 mg/（kg·d）或地夫可特0.9 mg/（kg·d）。但
中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào) 2021年30期2021-01-04
- Wiskott-Aldrich綜合征兒童WAS基因突變分析研究
類包括錯(cuò)義突變、無(wú)義突變、拼接位點(diǎn)突變、缺失突變、插入突變和復(fù)合突變等[10]。國(guó)外資料報(bào)道的 WAS 基因突變中最多見(jiàn)錯(cuò)義突變，其次是拼接位點(diǎn)突變、小的缺失突變及無(wú)義突變，而插入突變、大的缺失突變及復(fù)合突變較少見(jiàn)。而國(guó)內(nèi)最常見(jiàn)的突變類型為缺失突變，其次為無(wú)義突變、錯(cuò)義突變、剪接突變和插入突變。EVHl區(qū)突變占已報(bào)道WASP基因突變一半以上[11]?，F(xiàn)已明確WASP基因的6個(gè)突變熱點(diǎn)290C>N/29 l G>N(R86C/H/L)、168C>T(T45M
遼寧醫(yī)學(xué)雜志 2020年4期2020-10-27
- miR-133a介導(dǎo)Bcl-xl表達(dá)調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡
mimics)、無(wú)義序列(NC)、沉默無(wú)義序列(inhibitor NC, in NC)由上海吉瑪基因生物有限公司合成，脂質(zhì)體Lipofectamine RNAiMAX Reagent購(gòu)買(mǎi)于賽默飛世爾科技公司，RIPA蛋白裂解液購(gòu)于上海雅酶生物科技有限公司，兔抗Bcl-xl及兔抗caspase3購(gòu)于美國(guó)Cell Signaling Technology公司，鼠抗β-actin購(gòu)于美國(guó)Proteintech生物公司。1.2 細(xì)胞培養(yǎng)首先纖連蛋白包被培養(yǎng)瓶(板
醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào) 2020年8期2020-08-14
- miR-152靶向IRS-1對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞增殖、遷徙及侵襲的影響
胞中,分別命名為無(wú)義轉(zhuǎn)染組和miR-152 siRNA組,不轉(zhuǎn)入任何載體的SW480細(xì)胞為對(duì)照組。轉(zhuǎn)染24 h將各組SW480細(xì)胞正常培養(yǎng),待后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。1.3 qRT-PCR法檢測(cè)SW480細(xì)胞中miR-152和IRS-1 mRNA表達(dá)將對(duì)照組、無(wú)義轉(zhuǎn)染組和miR-152 siRNA組SW480細(xì)胞培養(yǎng)24 h,收集細(xì)胞,使用TRIzol試劑提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA,采用qRT-PCR法檢測(cè)miR-152和IRS-1 mRNA表達(dá)水平,內(nèi)參基因
山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2020年6期2020-07-14
- 1例復(fù)合雜合突變導(dǎo)致遺傳性凝血因子Ⅺ缺陷癥家系的基因分析
738G＞A雜合無(wú)義突變導(dǎo)致p.Trp228stop，第12號(hào)外顯子存在c.1325delT缺失突變導(dǎo)致p.L424CfsX8。其母親和外祖母存在p.Trp228stop突變雜合子，其父親和祖父存在p.L424CfsX8突變雜合子。詳見(jiàn)圖2、表2。圖2 （F11）基因第7和第12外顯子測(cè)序結(jié)果。2A：c.738G＞A 雜合無(wú)義突變；2B：c.738G 野生型；2C：c.1325delT缺失突變；2D：c.1325野生型。表2 先證者及家系成員基因分析結(jié)果3
浙江實(shí)用醫(yī)學(xué) 2020年1期2020-06-05
- NMD逃逸機(jī)制及其在疾病治療中的應(yīng)用
京 100020無(wú)義介導(dǎo)的mRNA降解(nonsense-mediated mRNA decay, NMD)是指在病理或正常生理情況下mRNA上出現(xiàn)了提前終止密碼子(premature termination codon, PTC)，從而導(dǎo)致mRNA降解。它是一種廣泛存在的mRNA質(zhì)量監(jiān)控機(jī)制。近年來(lái)，在多種疾病中發(fā)現(xiàn)某些PTC并未觸發(fā)NMD，這種現(xiàn)象被稱為NMD逃逸(NMD escape)，然而其確切機(jī)制尚不十分清楚。目前公認(rèn)的兩個(gè)學(xué)說(shuō)為：(1) PTC
遺傳 2020年4期2020-04-21
- Dubin-Johnson綜合征分子遺傳學(xué)研究進(jìn)展
包括：錯(cuò)義突變、無(wú)義突變、剪接突變、調(diào)節(jié)突變、刪除/缺失突變、插入突變、小插入-缺失突變、復(fù)雜重排突變，其中絕大多數(shù)是堿基置換突變導(dǎo)致的錯(cuò)義突變和無(wú)義突變，見(jiàn)表1。表1 Dubin-Johnson綜合征編碼基因ABCC2突變類型續(xù)上表突變類型核苷酸改變突變位點(diǎn)蛋白質(zhì)改變參考文獻(xiàn)錯(cuò)義/無(wú)義c.298C>TExon.2p.R100*Shoda(2003)HepatolRes27:322Xiong(2015)Science347:1254806c.3732T>G
中國(guó)婦幼健康研究 2019年11期2019-12-06
- miR-145通過(guò)調(diào)控解聚素-金屬蛋白酶17對(duì)MCF-7乳腺癌細(xì)胞的影響
組（未行轉(zhuǎn)染）、無(wú)義序列組（轉(zhuǎn)染無(wú)意義miRNA）。細(xì)胞達(dá)到80%融合時(shí)，轉(zhuǎn)染過(guò)程嚴(yán)格按照脂質(zhì)體Lipofectamine 2000 說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，對(duì)照組（加入等體積PBS 緩沖液）、轉(zhuǎn)染組（空白培養(yǎng)基+Lipofectamine 2000+miR-145 mimics）、無(wú)義序列組（空白培養(yǎng)基+Lipofectamine 2000+NC-miRNA），轉(zhuǎn)染終濃度為50 nmol/L，轉(zhuǎn)染6 h，繼續(xù)培養(yǎng)。1.3 qPCR 檢測(cè)各組miR-145，ADAM1
醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào) 2019年11期2019-11-29
- 沉默miR-345聯(lián)合5-FU對(duì)胃癌MGC803細(xì)胞增殖能力及凋亡的影響
白對(duì)照組；B組：無(wú)義序列組；C組：反義miR-345組；D組：5-FU處理組；E組：反義miR-345+5-FU聯(lián)合組。未經(jīng)處理的MGC803細(xì)胞為空白對(duì)照組；合成錯(cuò)配寡核苷酸序列，利用Lipofectamine 2000脂質(zhì)體將其轉(zhuǎn)染入MGC803細(xì)胞為轉(zhuǎn)染無(wú)義序列組；合成miR-345反義寡核苷酸序列，利用Lipofectamine 2000脂質(zhì)體將其轉(zhuǎn)染入MGC803細(xì)胞，為反義miR-345組；40 μg/ml 5-FU單獨(dú)處理細(xì)胞為5-FU處理組
胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志 2019年6期2019-06-21
- 無(wú)義突變與“遺傳補(bǔ)償效應(yīng)”
馬志鵬，陳軍?無(wú)義突變與“遺傳補(bǔ)償效應(yīng)”馬志鵬，陳軍浙江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，生命系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)與保護(hù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，杭州 310058“遺傳補(bǔ)償效應(yīng)”(genetic compensation response, GCR)是近年來(lái)在斑馬魚(yú)()中最先描述的一個(gè)遺傳現(xiàn)象，是指當(dāng)敲低某一個(gè)基因時(shí)有明顯的表型，但此基因的敲除遺傳突變體由于其他基因的上調(diào)反而沒(méi)有表型。這種基因敲低和敲除表型上的差異并非斑馬魚(yú)所獨(dú)有，在擬南芥()、小鼠()等模式生物中都觀察到此種現(xiàn)象。這種奇
遺傳 2019年5期2019-05-21
- miR-182靶向調(diào)控FOXO3a表達(dá)對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響
分別加入對(duì)照組、無(wú)義序列miR-182、miR-182 micmics已整合成功的脂質(zhì)體，完成細(xì)胞轉(zhuǎn)染，繼續(xù)培養(yǎng)約48 h直至轉(zhuǎn)染成功后的細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)期。1.3 構(gòu)建FOXO3a質(zhì)粒使用pc DNA3作為空載體質(zhì)粒，報(bào)告強(qiáng)化綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)質(zhì)粒載體，分別將野生型(亦稱無(wú)干擾型)FOXO3a 3′-非翻譯區(qū)(untranslated region, UTR)與突變型(亦稱過(guò)表達(dá)型
安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2019年4期2019-05-10
- 更正：堿基編輯系統(tǒng)研究進(jìn)展
中，對(duì)基因進(jìn)行了無(wú)義突變，建立了杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良的小鼠疾病模型”現(xiàn)更正為“Jin-Soo Kim實(shí)驗(yàn)室率先利用ABE7.10對(duì)小鼠基因引入了錯(cuò)義突變，并將ABE7.10包裹到雙反式剪接的AAV病毒系統(tǒng)中，遞送到小鼠模型中進(jìn)行無(wú)義突變的較正，成功治療了杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良的小鼠疾病表型?！庇纱私o讀者帶來(lái)的不便，作者深表歉意！DOI: 10.16288/j.yczz.19-316
遺傳 2019年10期2019-03-02
- CPEB4對(duì)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、遷移的影響
分3組，對(duì)照組、無(wú)義siRNA組及CPEB4 siRNA組。以5×105mL-1將U87細(xì)胞接種于6孔板，待細(xì)胞融合度達(dá)到75%時(shí)，無(wú)義siRNA組及CPEB4 siRNA組參照Lipofectamine2000轉(zhuǎn)染試劑盒(美國(guó) Invitrogen公司)說(shuō)明操作，分別轉(zhuǎn)染無(wú)義siRNA和CPEB4 siRNA；對(duì)照組不轉(zhuǎn)染。每組設(shè)置6個(gè)復(fù)孔。CPEB4 siRNA及無(wú)義siRNA均由上海吉瑪公司設(shè)計(jì)并合成，正義鏈序列分別為5’-GCAAAGCAATACT
- 沉默miR-345表達(dá)聯(lián)合氟尿嘧啶對(duì)胃癌細(xì)胞MGC803增殖的影響
GUCC-3’，無(wú)義序列5’-UCUACUCUUAGGAGGUUGUUGATGCA-3’。將細(xì)胞接種于培養(yǎng)板，LipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染，在5 min內(nèi)同稀釋的寡核苷酸序列混合，將復(fù)合物加入到細(xì)胞培養(yǎng)板中繼續(xù)培養(yǎng)48 h。3.miR-345表達(dá)水平的實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)miR-345反向引物5’-TATGCTGCTCGGGACCTGATCCTCA-3’，正向引物5’-GTCGTATCCAGTGCA-GGGTCCGAGG-3’，內(nèi)參U6
新醫(yī)學(xué) 2018年7期2018-07-23
- 一例散發(fā)遺傳性對(duì)稱性色素異常癥ADAR1基因新突變
成編碼氨基酸發(fā)生無(wú)義突變，最終導(dǎo)致第388位氨基酸形成終止密碼子，即P.E388X，由此產(chǎn)生的蛋白質(zhì)將缺失839位氨基酸。而臨床表型正常的患者的父母未發(fā)現(xiàn)突變，表明該突變是一個(gè)新生突變(de novo mutation)，并且本研究檢測(cè)了100名健康對(duì)照均未出現(xiàn)上述突變。以上研究結(jié)果證明筆者發(fā)現(xiàn)的無(wú)義突變(c.1162G>T)是該患者的致病突變而不是單核苷酸多態(tài)性。圖2 a:正常人ADAR1基因部分序列圖；b:患者雜合無(wú)義突變，c．1162G>T，箭頭所示
中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志 2018年6期2018-07-02
- FOXQ1-siRNA對(duì)甲狀腺乳頭癌TPC-1細(xì)胞侵襲遷移的影響及其機(jī)制
1-siRNA、無(wú)義序列RNA購(gòu)于蘇州吉瑪基因有限公司，RNA提取試劑盒購(gòu)于日本TaKaRa公司、反轉(zhuǎn)錄試劑盒購(gòu)于北京GenStar公司，SYBR Green qPCR Master Mix、FOXQ1引物及LipofectamineTM2000均購(gòu)于美國(guó) Invitrogen公司，兔抗人FOXQ1多克隆抗體購(gòu)于英國(guó)Abcam公司，兔抗人MMP7、MMP9、AKT及p-AKT(Ser473)均購(gòu)于美國(guó)CST公司，HR標(biāo)記的山羊抗兔二抗、GAPDH抗體、We
山東醫(yī)藥 2018年13期2018-05-25
- 轉(zhuǎn)染反義微小RNA?155對(duì)人皮膚鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株A431生長(zhǎng)的影響
UAA?3′）、無(wú)義對(duì)照序列miRNA?155（5′?CAGUACUUUUGUGUAGUACA A?3′）、Hairpin?itTMmiRNA熒光定量PCR試劑盒、U6核內(nèi)小RNA（snRNA）熒光定量校正試劑盒（上海吉瑪制藥技術(shù)有限公司）。酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀、FACScalibur流式細(xì)胞儀（美國(guó)BD公司），插入式細(xì)胞培養(yǎng)皿（Transwell）（美國(guó)康寧公司）。二、細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基于37℃、5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)A431
中華皮膚科雜志 2018年3期2018-04-09
- 沉默ANK2基因表達(dá)對(duì)胃癌細(xì)胞增殖、周期以及轉(zhuǎn)移能力的影響
為3組：對(duì)照組、無(wú)義組、siRNA-ANK2組。轉(zhuǎn)染前2 h，更換為無(wú)胎牛血清的培養(yǎng)基，將4 μg siRNA ANK2或siRNA 無(wú)義序列與250 μl OPTI-MEM培養(yǎng)基混合均勻，10 μl Lipofectamine 2000與250 μl OPTI-MEM培養(yǎng)基混勻，將稀釋的DNA混合液加入到Lipofectamine 2000混合液中，室溫靜置20 min，然后將混合液轉(zhuǎn)移至6孔板中，混勻，轉(zhuǎn)染4～6 h，將培養(yǎng)基更換為完全培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)
胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志 2018年3期2018-03-20
- microRNA-34a對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞生物學(xué)特性的影響
分為空白對(duì)照組、無(wú)義序列轉(zhuǎn)染組及microRNA-34a轉(zhuǎn)染組，檢測(cè)microRNA-34a對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U87增殖、凋亡、遷移、侵襲能力的影響。結(jié)果膠質(zhì)瘤組織microRNA-34a相對(duì)表達(dá)量為(0.53±0.48)，顯著低于正常腦組織的(1.38±0.25)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。不同惡化程度膠質(zhì)瘤組織microRNA-34a相對(duì)表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。microRNA-34a轉(zhuǎn)染組轉(zhuǎn)染后48 h細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率、轉(zhuǎn)染后細(xì)
海南醫(yī)學(xué) 2017年23期2018-01-03
- 反義缺氧誘導(dǎo)因子-1α對(duì)人膀胱癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響①
1α轉(zhuǎn)染組，轉(zhuǎn)染無(wú)義序列組和空白對(duì)照組。②RNA提取及Western blot檢測(cè):按照Trizol試劑盒說(shuō)明書(shū)提取轉(zhuǎn)染細(xì)胞總RNA，采用Western blot檢測(cè)HIF-1α表達(dá)量。③檢測(cè)T24細(xì)胞增殖能力，細(xì)胞周期和凋亡變化 在細(xì)胞被轉(zhuǎn)染72 h后，用MTT比色法測(cè)定細(xì)胞增殖率，F(xiàn)CM鑒定細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞周期。2 結(jié)果2.1HIF-1α在3組細(xì)胞中的表達(dá) Western blot法檢測(cè)結(jié)果(見(jiàn)圖1)顯示，AS-HIF-1α轉(zhuǎn)染組的HIF-1α表達(dá)明顯
中國(guó)免疫學(xué)雜志 2017年10期2017-10-24
- 無(wú)義mRNA降解途徑的機(jī)制與進(jìn)化
030006)無(wú)義mRNA降解途徑的機(jī)制與進(jìn)化柴寶峰，王美，石文鑫，柴楊麗，呂佳(山西大學(xué) 黃土高原研究所，山西 太原 030006)含有無(wú)義突變的mRNA在細(xì)胞中被無(wú)義介導(dǎo)的mRNA降解(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)途徑選擇性降解,同時(shí)該途徑還能調(diào)控細(xì)胞中一些生理性RNA的豐度。NMD途徑的核心是含有無(wú)義突變的mRNA的識(shí)別和降解機(jī)制,其中關(guān)鍵因子上游移碼蛋白(up-frameshift,UPF)和生殖器形態(tài)效應(yīng)抑
- 沉默缺氧誘導(dǎo)因子-2α對(duì)乳腺癌細(xì)胞化療敏感性的影響
組、MCF-7/無(wú)義siRNA組，細(xì)胞轉(zhuǎn)染9 h后，更換新鮮完全培養(yǎng)基。1.2.2 RT-PCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞中HIF-2α mRNA的表達(dá) RNA提取按照Trizol RNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，cDNA第一條鏈體外逆轉(zhuǎn)錄合成，以cDNA為模板，擴(kuò)增HIF-2α mRNA。引物序列HIF-2α上游：5′-TGAAAACGAGTCCGAAGCC-3′，下游：5′-GTGGCTGACTTGAGGTTGA-3′；GAPDH上游：5′-ATTCATCTCT
臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志 2017年5期2017-06-24
- 長(zhǎng)鏈非編碼RNA SPRY4-IT1 對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞HT-29 增殖凋亡的影響及機(jī)制
轉(zhuǎn)細(xì)胞株，并設(shè)立無(wú)義轉(zhuǎn)染組和空白對(duì)照組；qRT-PCR檢測(cè)各組HT-29細(xì)胞中SPRY4-IT1 mRNA的表達(dá)量；CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖活力；克隆試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的克隆形成率；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞周期。Western blotting法檢測(cè)凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達(dá)量。結(jié)果 LncRNA SPRY4-IT1在結(jié)直腸細(xì)胞株(HT-29、HCT-116、SW-480、SW-620、Caco-2)相對(duì)FHC的表達(dá)增高，以HT-29細(xì)胞株中的表達(dá)最
山東醫(yī)藥 2017年13期2017-05-04
- 選擇性剪接與無(wú)義介導(dǎo)的mRNA降解機(jī)制研究進(jìn)展＊
3］。AS 還與無(wú)義介導(dǎo)的 mRNA 降解（nonsense mediated mRNA decay，NMD）機(jī)制相偶聯(lián)，當(dāng)某種基因表達(dá)異常升高時(shí)，通過(guò)AS產(chǎn)生能被NMD降解的mRNA剪接異構(gòu)體而下調(diào)該基因表達(dá)，使其維持在正常范圍。已知AS和NMD與人類多種遺傳病和癌癥發(fā)生密切相關(guān)［4，5］。 現(xiàn)就 AS和 NMD 作用機(jī)制做一簡(jiǎn)要綜述。1 選擇性剪接（AS）人類基因由編碼蛋白質(zhì)的外顯子（exon）和不編碼的內(nèi)含子（intron）共同構(gòu)成?；虺跏嫁D(zhuǎn)錄產(chǎn)物
實(shí)用醫(yī)藥雜志 2017年11期2017-04-04
- 多烯紫杉醇聯(lián)合反義miR-21對(duì)人胰腺癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響
分為空白對(duì)照組、無(wú)義序列組、DTX組、AS-miR-21組、DTX+AS-miR-21組。AS-miR-21組、DTX+AS-miR-21組轉(zhuǎn)染AS-miR-21，無(wú)義序列組轉(zhuǎn)染Lipofectamine2000，均轉(zhuǎn)染24 h；DTX+AS-miR-21組轉(zhuǎn)染后予15 μmol/L的DTX作用48 h；空白對(duì)照組未行任何處理，DTX組加入15 μmol/L的DTX作用48 h。收集各組細(xì)胞，RT-PCR法檢測(cè)miR-21的相對(duì)表達(dá)量，克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞
山東醫(yī)藥 2017年8期2017-03-13
- ADAM17-shRNA對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制
CF-7細(xì)胞分為無(wú)義序列組、對(duì)照組、轉(zhuǎn)染組。針對(duì)ADAM17基因設(shè)計(jì)合成4個(gè)特異性ADAM17-shRNA(ADAM17-shRNA-1219、ADAM17-shRNA-1508、ADAM17-shRNA-1134、ADAM17-shRNA-297)，采用電穿孔法轉(zhuǎn)染MCF-7細(xì)胞：無(wú)義序列組轉(zhuǎn)染無(wú)義序列ADAM17-shNC，轉(zhuǎn)染組分別轉(zhuǎn)染ADAM17-shRNA序列ADAM17-shRNA-1219、ADAM17-shRNA-1508、ADAM17-s
山東醫(yī)藥 2017年4期2017-02-23
- ADAM17-shRNA在缺氧條件下對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7增殖的影響*
磷酸鹽緩沖液)、無(wú)義序列組(轉(zhuǎn)染無(wú)義序列ADAM17-shRNA)和shRNA轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染ADAM17-shRNA，選擇沉默ADAM17基因效率最高的shRNA用于后續(xù)試驗(yàn))。分別采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、iCELLigence、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞ADAM17mRNA的表達(dá)水平、細(xì)胞增殖活性和細(xì)胞周期變化。結(jié)果 4個(gè)shRNA轉(zhuǎn)染組對(duì)MCF-7細(xì)胞的ADAM17基因表達(dá)均有沉默作用，與對(duì)照組及無(wú)義序列組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PRNA；聚合酶鏈反應(yīng)；缺氧；
重慶醫(yī)學(xué) 2017年1期2017-02-10
- Hailey-Hailey病四個(gè)家系的ATP2C1基因突變分析
delC）及1個(gè)無(wú)義突變（c.2416C＞T），其中2個(gè)移碼突變?yōu)槭状螆?bào)道。這些突變的發(fā)現(xiàn)有助于HHD的診斷，并豐富了HHD相關(guān)ATP2C1突變數(shù)據(jù)庫(kù)。Hailey-Hailey??；突變分析；ATP2C1基因；DNA測(cè)序梅愛(ài)華Hailey-Hailey病（Hailey-Hailey disease，HHD；OMIM 169600），又稱家族性慢性良性天皰瘡，是一種常染色體顯性遺傳性皮膚病[1,2]。其致病基因ATP2C1編碼人類高爾基體分泌途徑Ca2+/M
實(shí)用皮膚病學(xué)雜志 2016年5期2016-11-30
- 長(zhǎng)鏈非編碼RNA HOTAIR影響人舌鱗癌細(xì)胞Tb3.1增殖與凋亡的體內(nèi)外研究
HOTAIR組、無(wú)義序列組和空白對(duì)照組。前2組分別用siHOTAIR和無(wú)義序列轉(zhuǎn)染舌鱗癌細(xì)胞，空白對(duì)照組細(xì)胞不做任何處理。實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)HOTAIR的表達(dá)水平；四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）法檢測(cè)Tb3.1細(xì)胞增殖；Western blot檢測(cè)B細(xì)胞淋巴瘤2（Bcl-2）、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）、BAX的表達(dá)；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡；平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖情況；并行細(xì)胞衰老檢測(cè)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)建立Tb3.1裸鼠
天津醫(yī)藥 2016年10期2016-11-12
- 星火（外一首）
，時(shí)間最是無(wú)情和無(wú)義，滅了心底最暖的星火，丟了魂魄的最重。面朝著大海，我站成了大海，你在我里面浮沉，回憶是一條狂犬，追咬了許多年，卻還沒(méi)掌握進(jìn)退分寸。我想我們?cè)撨h(yuǎn)去了，遠(yuǎn)離這骯臟的生活，遠(yuǎn)離這霓虹的閃爍，你我的軀體已經(jīng)貧窮，你我的靈魂已經(jīng)空虛，去尋找你的星火燎原，去尋找我的星火燎原。一不小心就失去有時(shí)候，有些人不說(shuō)再見(jiàn)已離開(kāi)，有時(shí)候，有些事不用開(kāi)口也明白，有時(shí)候，有些路不走也會(huì)變長(zhǎng)，那些人，那些事，那些路，已成過(guò)往?？偸峭臻g發(fā)呆。轉(zhuǎn)身，陌路那些說(shuō)好不分
參花（上） 2016年8期2016-08-23
- Waardenburg綜合征Ⅳ型患兒SOX10基因新突變研究
OX10基因所有無(wú)義突變進(jìn)行文獻(xiàn)回顧和總結(jié)。方法收集一個(gè)WS4患兒的詳細(xì)臨床資料，簽署知情同意書(shū)后獲取血樣，對(duì)包括SOX10、EDNRB、EDN3在內(nèi)的172個(gè)先天性巨結(jié)腸及綜合征相關(guān)基因進(jìn)行二代測(cè)序，并用聚合酶鏈反應(yīng)針對(duì)可疑致病突變進(jìn)行擴(kuò)增及Sanger測(cè)序驗(yàn)證，應(yīng)用GeneTool軟件及生物信息學(xué)網(wǎng)站的信息分析數(shù)據(jù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)患兒SOX10基因第4外顯子存在一雜合無(wú)義突變（c.838G＞T，p.E280X），父母均表現(xiàn)正常且未發(fā)現(xiàn)有該突變。結(jié)論發(fā)現(xiàn)一新的
中華耳科學(xué)雜志 2016年2期2016-06-30
- 一個(gè)遺傳性凝血因子Ⅺ缺陷癥家系的基因分析
16642T雜合無(wú)義突變，導(dǎo)致編碼第263位氨基酸谷氨酰胺提前出現(xiàn)終止密碼（Gln263stop）。結(jié)論：FⅪ基因第8號(hào)外顯子C16642T雜合無(wú)義突變是導(dǎo)致該遺傳性FⅪ缺陷癥家系FⅪ水平降低的主要原因。凝血因子Ⅺ；家系；雜合；無(wú)義突變遺傳性凝血因子X(jué)I（FXI）缺陷癥為常染色體隱性遺傳性疾病，曾被稱為血友病C，患者出血癥狀輕重不定，F(xiàn)XI水平高低與出血程度并不成正比，很少有自發(fā)性出血[1]。近年來(lái)的報(bào)道認(rèn)為，該缺陷癥的發(fā)生主要與FXI基因的突變有關(guān)[2-
溫州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2015年5期2015-12-27
- 微小 RNA-383 對(duì)骨肉瘤細(xì)胞生物學(xué)特性的影響
況：空白對(duì)照組、無(wú)義序列組和實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的凋亡率分別為 ( 8.56±1.45 ) %、( 12.6l±1.37 ) %、( 33.20±2.59 ) %，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 ( P＜0.05 )；細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)：空白對(duì)照組、無(wú)義序列組和實(shí)驗(yàn)組分別為( 82±5 ) 個(gè)、( 68±3 ) 個(gè)和 ( 45±7 ) 個(gè)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 ( P＜0.05 )；細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)：空白對(duì)照組、無(wú)義序列組和實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞穿膜數(shù)分別為 ( 82±5 ) 個(gè)、( 68±3 )
中國(guó)骨與關(guān)節(jié)雜志 2015年9期2015-11-30
- C-fos對(duì)體外培養(yǎng)仔豬睪丸間質(zhì)細(xì)胞睪酮分泌的影響
胞睪酮的產(chǎn)生，而無(wú)義tat ODNs由于與C-fos無(wú)同源互補(bǔ)序列，未觀察到類似的作用[4]。Schultz等研究證實(shí)，C-fos參與調(diào)控生精上皮更新期間生精細(xì)胞增殖、分化活動(dòng)[5]。從文獻(xiàn)中可以看出，國(guó)內(nèi)外的學(xué)者對(duì)C-fos的早期研究主要集中于體外培養(yǎng)的細(xì)胞，近年來(lái)轉(zhuǎn)向體內(nèi)，并且主要集中在人和鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞睪酮分泌的量和對(duì)睪酮合成途徑各關(guān)鍵酶的影響上，很少涉及到C-fos對(duì)豬及C-fos對(duì)睪丸間質(zhì)細(xì)胞睪酮分泌的影響。作者以榮昌仔豬為材料，通過(guò)反義核酸技術(shù)
中國(guó)獸醫(yī)雜志 2015年8期2015-08-08
- 荀巨伯①探病友
賊相謂曰：“我輩無(wú)義⑩之人，而入有義之國(guó)?！彼彀嘬姸€。一郡并獲全。（選自劉義慶《世說(shuō)新語(yǔ)》）[注解]①荀巨伯：東漢桓帝時(shí)人，生平不詳。②值：適逢。③賊：指入侵的軍隊(duì)。④郡：這里指城。⑤相視：看望你。⑥?。簱p害，毀壞。⑦一：整個(gè)。⑧男子：這里是表示輕蔑的稱呼。⑨獨(dú)止：一個(gè)人留下。⑩無(wú)義：不懂道義。漫讀引思文章采用對(duì)話描寫(xiě)的方法來(lái)表現(xiàn)荀巨伯不忍丟下有病的朋友獨(dú)自避難，而且愿“以我身代友人命”，這種把情義看得比生命還重的精神實(shí)在是難能可貴。做人只有像荀巨伯那樣
作文周刊(中考版) 2014年45期2015-07-27
- 杜預(yù)等注《左傳》“無(wú)寧，寧也”商榷
“無(wú)”為語(yǔ)助詞，無(wú)義，“無(wú)寧”則等同于“寧”，釋為“寧愿”、“寧可”等。在考察了“無(wú)寧”、“毋寧”、“不寧”、“無(wú)亦”、“不亦”、“無(wú)乃”、“毋乃”等一系列詞語(yǔ)之后，我們認(rèn)為這種注解似可商榷，將“無(wú)”看作語(yǔ)助詞多有不當(dāng)。本文將從有語(yǔ)氣詞標(biāo)記的反問(wèn)句、無(wú)語(yǔ)氣詞標(biāo)記的反問(wèn)句與陳述句三個(gè)維度展開(kāi)，句法與語(yǔ)義相結(jié)合，對(duì)“無(wú)寧”諸詞在不同句式中的表現(xiàn)分別予以考察。一、與語(yǔ)氣詞“乎”同現(xiàn)構(gòu)成反問(wèn)句“無(wú)寧”等詞的典型用法之一便是用在反問(wèn)句中，且常與句末語(yǔ)氣詞“乎”（或其
語(yǔ)文學(xué)刊 2015年16期2015-05-27
- MACC1基因沉默對(duì)肺癌細(xì)胞促血管生成的影響
RNA 1～3及無(wú)義siRNA由廣州銳博生物有限公司合成，Platinum?SYBR?Green qPCR試劑盒購(gòu)自Invitrogen公司。1.2方法1.2.1肺腺癌細(xì)胞的培養(yǎng)及傳代 復(fù)蘇A549，XWLC-05，GLC，SPC-A-1，YTMLC細(xì)胞株，加入含10% FBS的1640培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。每2～3 d進(jìn)行常規(guī)換液傳代。1.2.2RT-qPCR 法檢測(cè)細(xì)胞MACC1 mRNA的表達(dá) 采用Trizol 一步法提取各株細(xì)
中國(guó)老年學(xué)雜志 2014年14期2014-09-12
- 《氓》注釋辯正一則
注釋：動(dòng)詞詞頭，無(wú)義。筆者認(rèn)為此條注釋欠妥。筆者廣泛查閱字典、詞典，對(duì)“載”的注釋各異：《簡(jiǎn)明古漢語(yǔ)字典》（四川人民出版社，1997年版）注：乃；且。一說(shuō)是動(dòng)詞詞頭?！对?shī)·衛(wèi)風(fēng)·氓》：“既見(jiàn)復(fù)關(guān)，載笑載言?！薄豆沤駶h語(yǔ)詞典》（商務(wù)印書(shū)館，2000年版）注：又，且。【例】載馳載驅(qū)，歸唁衛(wèi)侯。（《詩(shī)·鄘風(fēng)·載馳》）《古代漢語(yǔ)詞典》（商務(wù)印書(shū)館，2000年版）注：助詞。起加強(qiáng)語(yǔ)氣作用。多見(jiàn)于《詩(shī)經(jīng)》?！对?shī)經(jīng)·小雅·菁菁者莪》：“汎汎楊舟，載沉載浮?！比缛艚鉃椤皠?dòng)
中學(xué)語(yǔ)文 2014年15期2014-08-15
- 腦膠質(zhì)瘤中miR-7與EGFR/PI3K信號(hào)通路相關(guān)基因蛋白表達(dá)的關(guān)系
僅加入脂質(zhì)體;②無(wú)義序列組，加入無(wú)義序列和脂質(zhì)體;③miR-7轉(zhuǎn)染組:miR-7序列為5'-UUGUUUUAGUGAUCAAGAAGGU-3'。質(zhì)粒轉(zhuǎn)染:細(xì)胞生長(zhǎng)至60% ～70%匯合時(shí)，降低血清濃度至5%，然后將1 μg的質(zhì)粒與100 μL的LipoVecTM混合20 min后加入培養(yǎng)基中，4 h后換成含20%血清的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。轉(zhuǎn)染48 h后，用含200 ng/L G418的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，每3 d更換選擇培養(yǎng)液1次。14 d后細(xì)胞集落形成，未轉(zhuǎn)染組
山東醫(yī)藥 2014年27期2014-06-14
- 淺談古漢語(yǔ)偏義復(fù)音詞
”指晉國(guó)，“家”無(wú)義只起陪襯作用。例2：“國(guó)家”無(wú)偏義，“國(guó)”指天子統(tǒng)治的地方，“家”指諸侯統(tǒng)治的地方，作為單音詞連用的“國(guó)家”均恢復(fù)其固有的詞匯意義。有時(shí)“國(guó)家”也可分用為“天子建國(guó)”、“諸侯立家”。例3：“緩急”聯(lián)系下文當(dāng)偏指“急”就是急難的意思，“緩”無(wú)義起陪襯作用，是偏義復(fù)詞。例4：“緩急”無(wú)偏義，“緩”指“緩和”，“急”指“急迫”，是單音詞連用。例5：“衣裳”聯(lián)系下文“采采衣服”偏指“衣”即“衣服”，“裳”無(wú)義起陪襯作用，是偏義復(fù)詞。特點(diǎn)二：陪襯
教育教學(xué)論壇 2014年17期2014-05-05
- 不同濃度藥物PTC124和G418對(duì)HERG通道無(wú)義突變體的作用*
8對(duì)HERG通道無(wú)義突變體的作用*于海云，姚艷，張銀輝，龔菁，黃健，浦介麟目的： 通過(guò)對(duì)HERG基因無(wú)義突變體應(yīng)用不同劑量PTC124和G418來(lái)觀察其通道功能的恢復(fù)情況，并探討藥物的作用機(jī)制。方法： 制備HERG基因R1014X突變體，將野生型（WT）HERG及R1014X分別瞬時(shí)轉(zhuǎn)染至HEK293細(xì)胞，轉(zhuǎn)染24 h后將其置入含不同濃度的PTC124和G418的培養(yǎng)液中孵育24 h。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)各組細(xì)胞HERG信使核糖核酸（mRNA）的表達(dá)，
中國(guó)循環(huán)雜志 2014年6期2014-03-03
- 早熟終止密碼子通讀治療遺傳性癌癥綜合征的研究進(jìn)展
對(duì)基因的影響可分無(wú)義突變(nonsense mutation)、錯(cuò)義突變(missense mutation)和同義突變(same sense mutation)。同義突變是指堿基置換后，雖然每個(gè)密碼子變成了另一個(gè)密碼子，但改變前、后密碼子所編碼的氨基酸不變，故實(shí)際上不會(huì)發(fā)生突變效應(yīng)。錯(cuò)義突變是指編碼某種氨基酸的密碼子經(jīng)堿基替換以后，變成編碼另一種氨基酸的密碼子，從而使多肽鏈的氨基酸種類和序列發(fā)生改變，使多肽鏈喪失原有功能。無(wú)義突變是指由于某個(gè)堿基的改變，
腫瘤預(yù)防與治療 2014年2期2014-01-21
- miR-155反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染對(duì)甲狀腺癌細(xì)胞遷移、侵襲和MMP-13表達(dá)的影響
TTAA-3';無(wú)義寡核苷酸(oligodeoxyribonucleotides，ODN)序列:5'-ATCTCATACTACACTTGAACACT-3'，依據(jù)轉(zhuǎn)染試劑說(shuō)明書(shū)操作，加入等體積PBS以建立空白對(duì)照組。1.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)miR-155 mRNA的表達(dá)抽提細(xì)胞總RNA并精制，反轉(zhuǎn)錄為cDNA。定量 PCR(miR-155)上游引物:5'-CGCGCTTAATGCTAATCGTGA-3';下游引物:5'-GTGCAGGGTCCGAGG
- miR-155反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染對(duì)人大腸癌Lovo細(xì)胞侵襲的影響
R-155)組、無(wú)義寡脫氧核苷酸(ODN)組和對(duì)照組。測(cè)定熒光素酶活性驗(yàn)證3組細(xì)胞中miR-155的表達(dá)，采用Matrigel基質(zhì)生長(zhǎng)試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況，以Transwell方法檢測(cè)細(xì)胞的侵襲力，結(jié)果 與對(duì)照組和無(wú)義ODN組比較，轉(zhuǎn)染AS-miR-155組Lovo細(xì)胞miR-2l表達(dá)水平降低;Matrigel基質(zhì)生長(zhǎng)試驗(yàn)顯示，轉(zhuǎn)染AS-miR-155組Lovo細(xì)胞體外培養(yǎng)克隆平均直徑較小，Transwell細(xì)胞侵襲試驗(yàn)顯示轉(zhuǎn)染AS-miR-155組穿膜細(xì)
中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥 2012年34期2012-10-15
- 自然法爾與晚年親鸞的精神救贖——《自然法爾事》文本的重釋
戒的詮釋——“以無(wú)義為本義”《自然法爾事》雖只字未提及他力,但文中處處不乏這一理論的體現(xiàn)。而作為自然法爾結(jié)論的“以無(wú)義為本義”,不僅以他力為理論依據(jù),同時(shí)其詮釋破戒的意圖也十分明顯?！笆脑杆轮?不靠行者之力,此法德故謂之使然。人之初勿須自力之行,凡事應(yīng)循‘以無(wú)義為本義’。彌陀佛之誓愿、本與行者之力不符。若依南無(wú)阿彌陀佛,則勿須行者之行,無(wú)論行者善惡。此所謂自然?！盵4]73據(jù)法爾的道理,行者應(yīng)不靠自力。因而親鸞得出了遵循“以無(wú)義為本義”的結(jié)論。寺田彌
外國(guó)問(wèn)題研究 2010年1期2010-08-15
- 試譯小倉(cāng)百人一首(42)
。大意:為了無(wú)情無(wú)義的你，我整夜思慮不能成眠。長(zhǎng)夜漫漫，遲遲不見(jiàn)天明。這時(shí)連那門(mén)間的縫隙都讓人感到無(wú)義無(wú)情。在這首和歌中，作者站在女性的角度，描寫(xiě)了她們?cè)陂L(zhǎng)夜中思念薄情男子而輾轉(zhuǎn)難眠的情境。其中“連那門(mén)間的縫隙都讓人感到無(wú)義無(wú)情”一句的修辭技巧極具新意。女子在想:不光是你無(wú)情，看起來(lái)連老天爺都在跟我作對(duì)，遲遲不肯天明!漢譯:長(zhǎng)夜漫漫漸入深，輾轉(zhuǎn)反側(cè)思紛紛。望門(mén)徒盼天破曉，負(fù)義豈止薄情人!
東北亞外語(yǔ)研究 2010年6期2010-04-24
- 關(guān)于新教材語(yǔ)文第三冊(cè)古文的兩處注解
”字只作為陪襯，無(wú)義?！赌印罚骸敖裼幸蝗巳雸@圃，竊其桃李?！币馑际牵含F(xiàn)在有一個(gè)人進(jìn)入了園中?！皥@”是種樹(shù)的地方，“圃”是種菜的地方。按句中應(yīng)為種樹(shù)的地方，所以義偏“園”，“圃”作陪襯，無(wú)義。第二、聯(lián)系下文。“匹夫之有重于社稷也”是“亦以明死生之大”中的“大”的進(jìn)一步解釋。而且課本對(duì)這句話的注解是“匹夫一死，關(guān)系國(guó)家興亡，非常重大”。只說(shuō)“死”的意義，并未說(shuō)生的意義。因此，只有把“死生”看作偏義詞，偏在“死”，才能與下文保持一致。第三、《五人墓碑記》所記的
現(xiàn)代語(yǔ)文(教學(xué)研究) 2006年11期2006-01-30